分析一种新的 S-100 样钙结合蛋白，其表达随着细胞永生性的获得而增加-猫眼课题宝

分析一种新的 S-100 样钙结合蛋白，其表达随着细胞永生性的获得而增加

批准号：

63480129

负责人：

遠藤英也

金额：

$1.79万

依托单位：

Kyushu University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)

财政年份：

1988

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1988 至 --

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63480129/

关键词：

pEL98 cDNAクローン不死性獲得塩基配列 S-100様カルシウム結合タンパク質遺伝子ファミリー

项目摘要

项目成果

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不死性を獲得している樹立培養細胞や癌細胞などで特異的に発現の見られる配列として単離したEL98cDNAについては引続き解析を行い、以下の結果を得た。1.EL98のタンパク質コーディング領域をファージベクターpSP64に挿入し、SP6RNAポリメラーゼによって転写させて得られたRNAと、ハイブリセレクト法によって調製した細胞RNAとをin vitroの系で翻訳した。その結果、何れのRNAを用いた場合にも等電点5.4、分子量12,000のタンパク質が検出され、塩基配列から推測された値とほぼ一致することがわかった。従って、転写の見られる細胞においては、EL98タンパク質もしくはその相同タンパク質が産生され得るものと考えられる。EL98タンパク質のカルシウム結合能の有無を調べるため、大腸菌の発現ベクターにEL98を連結し、生産の最適化と精製について実験中であり、あわせてEL98タンパク質の抗体を作成することを考えている。2.EL98と相同な配列の発現が観察されたHeLa細胞のcDNAライブラリーから、相同配列をもつクローンをスクリーニングし、この塩基配列を決定したところ、全く同じ長さのタンパク質をコードし得るORFを有し、この領域の塩基配列レベルでEL98と約90%のホモロジーを持つことが明らかとなった。また、このcDNAにはスプライス部位の異なるクローンが含まれていたので、さらにこれを解析中である。3.EL98をプローブとしたSouthern分析では、Hela細胞DNAを用いると、BamHIで約5.8kbのバンドが、XbaIでは7.4kbのバンドが検出された。このヒトゲノム遺伝子とEL98の由来するマウスBalb/cのゲノム遺伝子を解析するために、それぞれのゲノムライブラリーをスクリーニング中である。

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专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Goto K.;Furuichi M.;Fujiyoshi T.;Endo H.: "S-100 related proteins(in Stimulalus Response Coupling)" The Telford Press,

Goto K.；Furuichi M.；Fujiyoshi T.；Endo H.：“S-100 相关蛋白（刺激反应耦合）” Telford Press，

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

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