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ラット細胞核内DNA中に組み込まれたミトコンドリアゲノムの発現に関する研究

线粒体基因组整合入大鼠细胞核DNA的表达研究

基本信息

批准号：
61570127
负责人：
遠藤英也
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570127/
关键词：
ラットミトコンドリアゲノム遺伝子の組み込み遺伝子発現

项目摘要

目的;近年、色々な種において核内DNA中にミトコンドリアDNAとホモロジーを有するsequenceの存在が報告され、この近傍にrepetitive sequenceが存在している事がヒト、酵母等で明らかになっている。しかし、この核内DNAに組み込まれたミトコンドリアDNAとホモロジーを有するsequenceの機能あるいはRNAとして転写されるかどうかについてはいまだ情報が得られていない。そこで、我々はラット腹水肝癌AH60C細胞由来のcDNAライブラリーよりミトコンドリアDNAとホモロジーを有するcDNAクローンを単離し、その構造を解析することにより、上記の問題にアプローチしようとするものである。研究実績;ラット腹水肝癌AH60C細胞からTotal mRNAを抽出し、これに対応するcDNAライブラリーをLandらの方法で作製し、ミトコンドリアDNAをプローブとして、ハイブリダイズするcDNAクローンを得た。このcDNAクローンは癌細胞で特異的に発現されるrepetive sequenceともホモロジーを持つ事を明らかにした。次いで、このcDNAクローンのcDNA部分355bpの塩基配列を決定した。5′側約200bpが上記癌細胞で特異的に発現されるrepetitive sequenceと約90%のホモロジーを持ち、その3′側約350bpが、ミトコンドリアゲノムDNAと約90%のホモロジーを有していた。ラット腹水肝癌AH60C細胞より調整したゲノムDNAを、このcDNAクローンのミトコンドリアゲノムDNAとホモロジーを有する部分をプローブとして、サザーンブロッティング法により解析したところ、このcDNAに対応するDNAフラグメントが、ラットのゲノムDNAに組み込まれている事が明らかとなった。現在、このcDNAクローンに対応するゲノムクローンを単離し、解析を試みている。

Objective: In recent years, the existence of DNA sequence in the nuclear DNA of color species has been reported, and the existence of repetitive sequences in the nuclear DNA of yeast has been reported. The function of DNA sequence in DNA sequence is to obtain information about DNA sequence. The cDNA sequence of origin of ascites hepatoma AH60C cells was isolated and analyzed. The results of this study were as follows: Total mRNA was extracted from ascites hepatoma AH60C cells, Land cDNA was extracted from ascites hepatoma AH60C cells. This cDNA sequence is specific to cancer cells and can be repeated. The 355bp nucleotide sequence of the cDNA fragment was determined. About 200bp on the 5 'side is specifically found in the above cancer cells, and about 90% of the tumor cells are covered by repetitive sequences, and about 350bp on the 3' side is covered by mitochondrial DNA and about 90% of the tumor cells. AH60C cells are regulated by DNA sequencing, cDNA sequencing and DNA sequencing, and some of the DNA sequencing and sequencing are performed by DNA sequencing and DNA sequencing. Now, the cDNA library is ready for analysis.