歯髄線維芽細胞におけるブラジキニンによるカテプシンB活性化に対する情報伝達機構

缓激肽激活牙髓成纤维细胞组织蛋白酶B的信息转导机制

• 批准号: 04671123
• 负责人: 工藤 照夫
• 金额: --
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04671123/
• 关键词: 歯髄線維芽細胞; カテプシンB; ブラジキニン; des-Arg^9-ブラジキニン; アルギニン; セリン; スレオニンキナーゼ; チロシンキナーゼ; G-タンパク

本研究はbradykinin(BK)、des-Arg^9-BKあるいはL-arginine(L-Arg)刺激による細胞内カテプシンBの活性化機序をラット歯髄の培養線維芽細胞を用い、細胞内情報伝達の観点から検討することを目的とした。本研究費補助金による購入設備(恒温槽、吸引ポンプおよび実体顕微鏡)は歯髄細胞の培養ならびに酵素活性の測定に有効に用いられた。本研究においてBKあるいはdes-Arg^9-BKによるカテプシンBの活性化はdes-Arg^9-[Leu^8]-BKあるいは百日咳毒素(IAP)によって抑制されたが、L-ArgによるそれはLeu-ArgあるいはボツリヌスC_3酵素によって抑制された。上記刺激によるカテプシンBの活性化はいずれもCa^<2+>に依存していた。これらの結果はBKあるいはdes-Arg^9-BKによるカテプシンB活性化はB_1受容体およびIAP感受性Gタンパクを介しCa^<2+>依存性であるが、L-Argによるそれはkyotorphin受容体およびC_3酵素感受性Gタンパクを介しCa^<2+>依存性であることを示した。一方、カテプシンBの活性化はneomycin Bおよび各種セリン/スレオニンキナーゼの阻害剤によっていずれも抑制された。これらの結果はホスフォリパーゼCおよびセリン/スレオニンキナーゼがBK、des-Arg^9-BKあるいはL-ArgによるカテプシンBの活性化に関与していることを示唆した。Genisteinはdes-Arg^9-BKあるいはL-ArgによるカテプシンBの活性化を異なる機序で抑制し、チロシンキナーゼもこの活性化に関与していることを示した。BKあるいはL-ArgによるカテプシンBの活性化はL-NMMAによって抑制されたが、des-Arg^9-BKによるそれは抑制されなかった。また、L-Argによるこの活性化はβ-glycerophosphate(β-GP)によって増強されたが、BKあるいはdes-Arg^9-BKによるこの活性化はβ-GPによって抑制された。以上、歯髄線維芽細胞におけるBKによるカテプシンBの活性化はdes-Arg^9-BKとL-Argの作用の総合した作用によることが示された。

The aim of this study was to investigate the activation mechanism of intracellular protein B stimulated by bradykinin(BK), des-Arg^9-BK, and L-arginine (L-Arg) in cultured cells. The research grants were used to purchase equipment (thermostats, suction pumps, and microscopes) for cell culture and enzyme activity measurement. In this study, the activity of des-Arg^9-BK was inhibited by L-Arg and the activity of des-Arg^9-[Leu^8]-BK was inhibited by C_3. The activation of Ca^<2+> in the above mentioned stimuli depends on the activity of Ca^<2+>. The results showed that BK, L-Arg and Ca ^<2 +>-dependent enzyme activation of B_1 receptor and IAP receptor mediated by Ca^<2+>-dependent enzyme activation of kyotorphin receptor mediated by Ca ^<2 +>-dependent enzyme mediated by des-Arg^9-BK. The activity of neomycin B and the inhibition effect of neomycin B on the growth of human beings were investigated. The results of this study are as follows: BK, des-Arg^9-BK, L-Arg ^9, L-Arg ^9-BK, L-Arg ^9-B-Arg Genistein des-Arg^9-BK, L-Arg, L-Arg The activity of BK is inhibited by L-Arg and des-Arg^9-BK. The activity of L-Arg was inhibited by β-glycerophosphate(β-GP), BK, des-Arg^9-BK. The activation of des-Arg^9-BK and L-Arg in cultured cells was demonstrated.

项目成果

B.-F.Zhu,T.Kudo,S.Maeda and R.Inoki: "Involvement of GTP-binding proteins in actiavtion of cathepsin B by bradykinin in fibroblasts of the tooth pulp" Pain Research. 7. 27-31 (1992)

B.-F.Zhu、T.Kudo、S.Maeda 和 R.Inoki：“GTP 结合蛋白参与牙髓成纤维细胞中缓激肽激活组织蛋白酶 B”疼痛研究。

R.Inoki and T.Kudo: "A pain producing substance and analgesic substances in the tooth pulp" Bull.Kanagawa Dent.Coll.21(2). (1993)

R.Inoki 和 T.Kudo：“牙髓中产生疼痛的物质和镇痛物质”Bull.Kanakawa Dent.Coll.21(2)。

工藤 照夫: "歯髄における炎症性疼痛とその制御機構" 医学のあゆみ. 161. 127-130 (1992)

Teruo Kudo：“牙髓炎症性疼痛及其控制机制”医学史 161. 127-130 (1992)。

B.-F.Zhu,T.Kudo,S.Maeda and R.Inoki: "Activation of cathepsin B involved in enkiphlin production by bradykinin and its cleavage products in cultured fibroblasts of the rat dental pulp" J.Osaka Univ.Dent.Sch.32. 27-44 (1992)

B.-F.Zhu、T.Kudo、S.Maeda 和 R.Inoki：“大鼠牙髓培养成纤维细胞中缓激肽及其裂解产物参与 enkiphlin 产生的组织蛋白酶 B 的激活”J.Osaka Univ.Dent。

B.-F.Zhu,T.Kudo,S.Maeda and R.Inoki: "Protein kinases involved in the activation of cathepsin B in fibroblasts of the tooth pulp by bradykinin" Pain Research. 7. 33-37 (1992)

B.-F.Zhu、T.Kudo、S.Maeda 和 R.Inoki：“蛋白激酶参与缓激肽激活牙髓成纤维细胞中的组织蛋白酶 B”疼痛研究。