毒素原性大腸菌が産生する下痢原因毒素の構造と活性

产毒大肠杆菌产生的腹泻毒素的结构和活性

• 批准号: 01570245
• 负责人: 岡本 敬の介
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570245/
• 关键词: 大腸菌; 下痢原因毒素; 部位特異変異; 分子生物学; ワクチン

毒素原性大腸菌の感染により発症する下痢は菌が産生する二種類の下痢原因毒素の作用によるものである。それぞれの毒素は耐熱性下痢原因毒素(ST)、易熱性下痢原因毒素(LT)と呼ばれており、両毒素ともに精製されアミノ酸配列も決定された。しかし毒素の構造と活性の関係は不明であったので検討を加え以下の事柄を明かにした。1.研究代表者は既にSTpの11位のアスパラギンをアルギニンもしくはリジンに置換しても変異毒素の抗原性はほとんど変化しないが、毒素活性は失われることを見いだしていた。しかし変異毒素のこれらの性状は粗毒素液で調べた結果であり、変異毒素の性状を真に反映しているとは言えない。そこでこれらの変異毒素をモノクロナ-ル抗体との反応性を指標に、塩析、カラムクロマトグラフイ-、FPLCシステムを用いて精製した。精製したSTp(Argー11)、STp(Lysー11)の下痢活性はNative STpの1/500以下であるが、各々の変異毒素に対する抗体はNative STpの下痢活性を中和した。また変異毒素を産生する菌もマスウス腸管ル-プテストで陰性であり、これらの変異菌株がワクチンとして使用できる可能性をしめした。2.研究代表者は既にLTのAサブユニットの146位のアルギニンをグリシンに置換しても毒素活性は十分に発現されることを既に証明している。今回更に141位、143位、146位に存在するアルギニン残基をグリシンに置換した変異毒素を作製し検討を加えた結果、これらのアルギニンは毒素活性には直接関与しないが、毒素がAーBタイプのホロトキシンを形成するのに必要なアミノ酸であることが証明された。

Toxinogenic Escherichia coli infection causes diarrhea. Two types of diarrhea cause toxins are produced. For example, heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat susceptible diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (ST), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin (LT), heat resistant diarrhea causative toxin ( The relationship between the structure and activity of the toxin is unclear. 1. The study representative said that the 11th position of STp was replaced by the antigenicity of isotoxin and the activity of toxin. The properties of the toxin are reflected in the crude toxin solution. For example, if the isotoxin is detected, the antibody will be purified by the method of analysis and purification. Purified STp (Arg-11), STp (Lys-11) have diarrhea activity less than 1/500 of Native STp, and each isotoxin antibody neutralizes diarrhea activity of Native STp. The possibility of producing isotoxins by bacteria and bacteria is also discussed. 2. The researchers have demonstrated that the 146-position amino acid sequence of LT is very active. The results of this study demonstrate that the presence of these residues at positions 141, 143, and 146 is directly related to the activity of the toxin and necessary for the formation of the toxin.

项目成果

Keinosuke Okamoto: "Effect of Substitution of Acidic Amino Acid on Enterotoxic Activity of E.coli ST" Infection and Immunity. (1990)

Keinosuke Okamoto：“酸性氨基酸替代对大肠杆菌 ST 肠毒性活性的影响”感染和免疫。

Keinosuke Okamoto: "Substitution for Asparagine Residue at Position 11 of E.coli STp by Oligonucleotide-Directed Mutagenesis" Advances in Research on Cholera and Related Diarrheas. (1990)

Keinosuke Okamoto：“通过寡核苷酸定向诱变取代大肠杆菌 STp 第 11 位的天冬酰胺残基”霍乱和相关腹泻研究的进展。