難治性根尖性歯周尖におけるインターロイキン-1,6,および8遺伝子の発現

白细胞介素1、6和8基因在难治性根尖牙周根尖中的表达

• 批准号: 06671921
• 负责人: 長岡 成孝
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671921/
• 关键词: 難治性根尖性歯周炎; サイトカイン; 遺伝子発現

1.被検者:X線診および各種の臨床検査を行い,5歯以上の歯の根管充填が不十分で,かつ根尖部にX線透過像を有する患者ないしは急性化を繰り返す患者(5〜10名)と,同じく根管充填が不十分でありながら全くそのような症状を示さない患者(5〜10名)を選びだした.2.試料の採取:両グループの被検者から通法により,根管内侵出液および病変部組織(対象者のみ)を採取し,凍結保管した.3.根管内侵出液のIL-1,6,8活性の測定:初診時から根管充填時までの各時期における根管内侵出液のIL-1,6,8活性を ELIZA法を解析した.4.PCR法による根管内侵出液におけるIL-1,6,8遺伝子発現量の測定:2.で得た根管内侵出液から Total RNA Separator キットを用いて全細胞 RNA を抽出した.次に Cytokine MAPPingキットを用いて逆転写酵素による cDNA を合成した.最後に,IL-1,6,8に特異的なプライマーを用い,遺伝子増幅装置でIL-1,6,8に特異的な DNA 断片を増幅させた.この増幅した DNA を電気泳動し,その量を測定して,IL-1,6,8遺伝子の発現量を決定した.5.病変部組織内IL-1,6,8産生細胞の同定:2.で得た試料の一部から凍結およびパラフィン切片を作成し,各インターロイキンに対する抗体を用いた免疫組織学的染色を行い,各成分の組織内局在を調べた.さらに^<-35S>標識した各IL-1,6,8の cDNAプローブを使用してin situ hybridzation を行い,各インターロイキンmRNA の発現細胞を最終的に同定した.6.総括:以上の実験成績を総合的に解析して,難治性根尖性歯周炎における IL-1,6,8 各成分の活性の変動と遺伝子発現の状態を明らかにしようと試みつつある.しかし現時点では,2.で得た病変部組織組織の解析が終わっていないので,最終的な結論を出すには至っていない.

1. Recipients: X-ray patients were selected for all kinds of beds, root canal filling was not very good for patients over 5 years old, and the apical X-ray was not very good. 10 patients (5 to 10) were returned to patients with acute root canal filling, and 10 patients (5 to 10) were selected for complete root canal filling symptoms. 2. The raw material was collected by the tissue (tissue) of the disease department of the root canal, and kept by the tissue of the disease department. 3. Determination of IL-1,6,8 activity of invading liquid in root canal: the activity of IL-1,6,8 in invasive solution of root canal was measured by ELIZA method at different time after root canal filling. 4. PCR method was used to determine the activity of IL-1,6,8 in root canal invading liquid. The invading fluid from the root canal was extracted from the root canal by Total RNA Separator extraction with whole cell RNA. The second Cytokine MAPPing enzyme was used to synthesize the enzyme cDNA. At the end of the day, the DNA fragment of the IL-1,6,8 special device is used, and the DNA fragment of the device is used. The amplitude of the DNA is determined by the electrophoretic exercise, the measurement is measured, and the quantity of the IL-1,6,8 is determined. 5. The number of IL-1,6,8 positive cells in the tissue of the disease department is the same: 2. The samples were made into slices, the antibodies were stained by immuno-histochemistry, and the components were detected in the tissue. For each IL-1,6,8