βサラセミアの発症機序に関する研究
β-地中海贫血发病机制的研究
基本信息
- 批准号:06672294
- 负责人:
- 金额:$ 1.15万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
まずβサラセミアの遺伝子異常をSSCP,ダイレクトシーケンシングによって決定した。I non-RIによるα/β比の決定:それらのサンプルの網状赤血球よりα、βグロビンmRNAを抽出し、同一チューブ内でsingle-step RT-PCRを行った。PCRプロダクトをアガロースゲル電気泳動でα、βcDNAに分離し、エチジウム染色、あるいは銀染色後デンシトメーターで半定量化した。しかし、正常コントロールとサラセミア検体で差は見られなかった。おそらくRT-PCRのレベルでα、βの定量化が失われていると思われた。これを克服するために次の方法を試行中である。ストレプトアビジン標識バイオビーズにビオチン標識プローブを固層化し、それに検体中のmRNAとをハイブリダイゼーションによってまず固定する。固定化mRNAの末結合部に検出用のDig標識プローブをハイブリダイゼーションさせ、酵素発色、あるいは化学発光へ導き、定量化する(α/β比)。II 変異mRNAの直接増幅:スプライシング異常を有するサラセミアの網球中RNAより変異mRNAをRT-PCRによって直接増幅することを試みたが、増幅されたのは正常cDNAのみであった。おそらく変異mRNAの含量は正常mRNAよりはるかに少ないものと考えられた。これはスプライシング異常では異常mRNAが速やかに処理されていることを示唆している。異常mRNAが得られなかったので異常スプライシング部位の簡易決定法にはつながらなかった。
I don't know what to say. I don't know. I don't know what to do. I non-RI response alpha
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
服部幸夫: "ヘモグロビン異常" 臨床病理. 97. 152-155 (1994)
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