脳cdc2様ニューロフィラメントキナーゼ/cdk5の活性制御に関する研究

脑CDC2样神经丝激酶/CDK5活性调控研究

• 批准号: 06680607
• 负责人: 久永 真市
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06680607/
• 关键词: cdk5; cdc2キナーゼ; サイクリン; ニューロフィラメント; 脳; リン酸化; タウ; キナーゼ

cdk5はcdc2関連キナーゼの一つである。他の全てのcdc2関連キナーゼが細胞増殖の進行に関わっているのに対して、cdk5は最終分化し、分裂しない神経細胞で機能していると考えられている。神経細胞内でcdk5がどのような役割をしているのか、また、どのようにして活性化されているかは、非常に重要な問題である。すでに、我々は神経細胞内におけるcdk5の基質はニューロフィラメントのHサブユニット(NF-H)やタウ蛋白であることなどを報告してきた。今年度は、NF-Hキナーゼとして精製したcdk5の酵素的性質をcdc2キナーゼと比較し、また、活性化機構について検討した。cdk5はニューロフィラメント蛋白、微小管結合蛋白やRbがん抑制遺伝子産物などをcdc2キナーゼと同様よくリン酸化した。しかし、リン酸化の程度はcdc2キナーゼより低く、cdc2キナーゼより基質特異性が厳しいことが示唆された。cdk5はcdc2キナーゼの特異的阻害剤であるブチロラクトン1によってcdc2キナーゼと同程度の濃度で阻害された。しかし、cdc2キナーゼに強く結合するsuc1蛋白とはcdk5は結合しなかった。Xenopus卵抽出液を用いて分裂中期促進因子(MPF)活性を調べたところ、cdk5はcdc2キナーゼとよく似た酵素的性質を示すにも関わらず、MPF活性を示さなかった。精製したcdk5には26kDaの活性化サブユニットが結合していた。これは本来35kDaであったものが精製過程で分解されたものである。脳抽出液中のcdk5と35k制御サブユニットはフリーで存在しているものがかなりあった。今後は、それらがどのように結合するかを明らかにし、cdk5の活性化機構を解明していきたいと考えている。

cdk5 cdc2 All cdc2-related genes are involved in cell proliferation, cdk5 differentiation, and cell function. cdk5 in the brain cells is very important. In addition, we can also report the presence of cdk5 in human brain cells. This year, the NF-H enzyme is refined and the properties of the cdk5 enzyme are compared and the activation mechanism is discussed. cdk5 protein, microtube-binding protein Rb protein, inhibitory protein products cdc2 protein, and the like The degree of acidification is cdc2, cdc2, cdc3, cdc4, cdc5, cdc6, cdc6, cdc7, cdc8, cdc9, cdc10, c10, cdc10, cdc10, c10, c cdk5-cdc2-cdc5-cdc2-cdc5-cdcdc5-cdc2-cdcdc5-cdcdc2-cdcdc5-cdcdc5-cdc5-cdcdc2-cdcdc5-cdcdc2-cdc5-cdcdc5-cdc5-cdcd cdc2 is strongly bound to suc 1 protein and cdk5 is strongly bound to suc1 protein. Xenopus egg extract is used to modulate metaphase promoter (MPF) activity, cdk5, cdc2, and cdc2. Refined cdk5 is 26kDa and activated. The original 35kDa protein was dissolved in the purification process. The cdk5:35k system in the extract solution is not available. From now on, the activation mechanism of cdk5 will be clarified.

项目成果

Hisanaga,S.: "Phosphorylation of the nalive and the ressembled neurolilaments composed of NF-L,NF-M,and NF-H by the catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase." Mol.Blol.Cell. 5. 161-172 (1994)

Hisanaga,S.：“由 NF-L、NF-M 和 NF-H 组成的幼体和相似的神经丝被 cAMP 依赖性蛋白激酶的催化亚基磷酸化。”

Ookata,K.: "Cyclin B interaction with microtubule-associated protein 4(MAP4)targets p34^<cdc2>kinase to microtubules and is a potential regulator of M-phase microtubule dynamics." J.CellBiol.(in press.). (1995)

Ookata,K.：“细胞周期蛋白 B 与微管相关蛋白 4 (MAP4) 的相互作用将 p34^<cdc2> 激酶靶向微管，并且是 M 期微管动力学的潜在调节剂。”

Hosoi,T.: "Brain cdc2-like kinase/cdk5 is the major enzyme in porcine brain extracts that phosphorylates tau proteins.21GC03:J.Biochem." (in press.). (1995)

Hosoi,T.：“脑 cdc2 样激酶/cdk5 是猪脑提取物中磷酸化 tau 蛋白的主要酶。21GC03：J.Biochem。”

Ono,T.: "Dephosphorylation of abnormal sites of tau factor by protein phosphatases and its implication for Alzheimer's disease." Int.J.Neurochem.(in press.). (1995)

Ono,T.：“蛋白磷酸酶对 tau 因子异常位点的去磷酸化及其对阿尔茨海默病的影响。”