M期サイクリン、サイクリンAとBの細胞分裂進行における機能分担に関する研究

M期细胞周期蛋白A和B在细胞分裂过程中的功能分裂研究

• 批准号: 08265221
• 负责人: 久永 真市
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265221/
• 关键词: cdc2; サイクリン; 細胞分裂; がん; 細胞増殖; ヒトデ; 減数分裂; 卵

本研究の当初の目的は、がん細胞であるHeLa細胞を用いて細胞分裂進行に最も重要なサイクリンB・cdc2キナーゼとサイクリンA・cdc2キナーゼを、アンチセンスなどの方法により一方のみを不活性化し、それらの機能的な違いを明らかにしようとするものであった。しかし、同調した細胞での遺伝子導入が上手くいかず、材料をヒトデ卵に変えて研究を行った。cdc2キナーゼは真核細胞に共通の分裂期促進因子であり、細胞が異なってもその役割は変化しないものと考えられる。ヒトデ卵母細胞の第一減数分裂時には、サイクリンB・cdc2キナーゼのみが活性化され、サイクリンA・cdc2キナーゼの活性は第二減数分裂の分裂中期に初めて現れ、卵割期には両者の活性が検出された。サイクリンB・cdc2キナーゼは活性化にcdc25によるチロシン残基の脱リン酸化が必要であるのに対して、サイクリンA・cdc2キナーゼはチロシンリン酸化による活性制御を受けず、サイクリンAと結合すると直ちに活性化される。即ち、cdc25の活性化を阻害すれば、サイクリンA・cdc2キナーゼだけが活性化された状態がえられるはずである。そこで、cdc25の活性を阻害する抗体をヒトデ卵の第一卵割期前に微量注入し、細胞分裂の進行を観察した。実際に、サイクリンB・cdc2キナーゼの活性化が抑えられ、サイクリンA・cdc2キナーゼのみの活性が捉えられた。この時、細胞分裂は通常より20分ほど遅れて起こった。分裂が起こった時期には、サイクリンA・cdc2キナーゼの活性がサイクリンB・cdc2キナーゼの不足を補うように増加していたことから、全cdc2キナーゼの活性が一定レベルまで達すれば、分裂が進行するという可能性が考えられた。現在、詳しい解析を行っているところである。

は の の original purpose, this study が ん cells で あ る HeLa を with い て cell division are the most important な も に サ イ ク リ ン b. cdc2 キ ナ ー ゼ と サ イ ク リ ン a. cdc2 キ ナ ー ゼ を, ア ン チ セ ン ス な ど の way に よ り side の み を activeness し, そ れ ら の functionary な violations い を Ming ら か に し よ う と す る も Youdaoplaceholder0. し か し, homology し た cells で の posthumous son 伝 import が overhand く い か ず, material を ヒ ト に デ eggs - え を line っ て research た. Common cdc2 キ ナ ー ゼ は eukaryotic cells に の split phase promoting factor で あ り, cell が different な っ て も そ cut は の service - the し な い も の と exam え ら れ る. ヒ ト デ oocytes の first meiotic に は, サ イ ク リ ン b. cdc2 キ ナ ー ゼ の み が activeness さ れ, サ イ ク リ ン a. cdc2 キ ナ ー ゼ の active は early mid の split second meiosis に め て れ, egg cut period now に は struck is の active が 検 out さ れ た. サ イ ク リ ン b. cdc2 キ ナ ー ゼ は activeness に cdc25 に よ る チ ロ シ ン residues の off リ ン acidification が necessary で あ る の に し seaborne て, サ イ ク リ ン a. cdc2 キ ナ ー ゼ は チ ロ シ ン リ ン acidification に よ る active suppression を by け ず, サ イ ク リ ン A と combining す る と straight ち に activeness さ れ る. Namely ち, cdc25 の activeness を resistance against す れ ば, サ イ ク リ ン a. cdc2 キ ナ ー ゼ だ け が activeness さ れ た state が え ら れ る は ず で あ る. そ こ で, cdc25 の active を resistance against す る antibody を ヒ ト デ cut period before the first egg egg の に trace injection し, cell division の を 観 examine し た. Be interstate に, サ イ ク リ ン b. cdc2 キ ナ ー ゼ の activeness が え suppression ら れ, サ イ ク リ ン a. cdc2 キ ナ ー ゼ の み の active が catch え ら れ た. When <s:1>, cell division ほ usually よ ほ 20 minutes ほ 遅れて 遅れて った. Split が up こ っ た period に は, サ イ ク リ ン a. cdc2 キ ナ ー ゼ の active が サ イ ク リ ン b. cdc2 キ ナ ー ゼ fill insufficient の を う よ う に raised plus し て い た こ と か ら, whole cdc2 キ ナ ー ゼ が の activity must be レ ベ ル ま で da す れ ば, split が す る と い う possibility が exam え ら れ た. Now, please refer to the detailed analysis of the を line って ろである ると ろである ろである.

项目成果

Honma,N.: "Two Types of Apoptotic Cell Deitth of Rat Central Nervius System-Derived Nouroblastome B50 and B104 Celles:Apoptosis Induced Durimg Proliferation and after Differentiation" J.Neunochem. 67. 1857-1865 (1996)

Honma,N.：“大鼠中枢神经系统来源的神经母细胞组 B50 和 B104 细胞的两种类型的凋亡细胞死亡：凋亡诱导的 Durimg 增殖和分化后”J.Neunochem。

OkuMura.E.: "Initial Triggering of M-Phase in Starfish Oocyles:A Possible Novel Component of Maturation-pronoting Factor Besides cde2 Kinase" The Journal of Cell Biology. 132. 125-135 (1996)

OkuMura.E.：“海星卵细胞中 M 相的初始触发：除了 cde2 激酶之外，成熟促进因子的一个可能的新成分”《细胞生物学杂志》。

久永 真市: "情報伝達系における細胞骨格" 蛋白質 核酵 酵素. 142. 453-463 (1997)

Makoto Hisanaga：“信息转导系统中的细胞骨架”蛋白质核酶酶。 142. 453-463 (1997)