転写終結因子Rho蛋白の分子解剖

转录终止因子Rho蛋白的分子解剖学

• 批准号: 06680666
• 负责人: 重定 勝哉
• 金额: --
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06680666/
• 关键词: 転写終結; rho因子; RNA結合; ATP結合; ATPaseホモロジー; ランダム変異; 六量体形成; C_6対称配置

大腸菌転写終結因子rhoは46kDaの単一サブユニットからなる六量体の蛋白質因子である。これまでの研究からrho蛋白質は大きく三つの機能領域に分けることができることが知られている。すなわちN末およそ3分の1を占めるRNA結合領域、F_1-ATPaseとのホモロジーの高い中央領域、および機能が明らかでないC末領域である。我々はrho蛋白質の構造と機能との相関について理解を深めるため、rho蛋白質の各領域にランダムな変異を系統的に導入する試みを進めてきた。これまでに、特にC末領域の変異体について詳細な解析を行ったところ、この領域がATP結合とRNA結合との双方に重要な関与をしていることが明らかになった。また、最近bovine F_1-ATPaseの結晶構造が明らかにされたので、これをモデルとしてC末領域の変異体のうちATP結合能に欠陥のあるものの変異部位をプロットしてみると、それらは、全てATP結合部位の近傍に位置することが明らかとなった。このことはrho蛋白質のATP結合領域がF_1-ATPaseのそれと同様の立体構造をとることを強く示唆する。さらに、rho六量体は従来D_3配置をとると考えられていたが、これは誤りでありF_1-ATPaseと同様にC_6対称をとることが示唆された。この考えは我々が以前得ているクロスリンク実験の結果とも合致する。

Coliform 転 terminative factor rho 単 46kDa <s:1> 単 サブユニット らなる hexaplome <s:1> protein factor である. こ れ ま で の research か ら rho protein は big き く three つ に の function field points け る こ と が で き る こ と が know ら れ て い る. す な わ ち N late お よ そ accounted for 3 points の 1 を め る rna-binding field, F_1 - ATPase と の ホ モ ロ ジ ー の い central area, high お よ び function が Ming ら か で な い C at the end of the field で あ る. I 々 は rho protein と の structure function と の phase masato に つ い て understand を deep め る た め, rho protein の every field に ラ ン ダ ム な - different を system に import す る try み を into め て き た. こ れ ま で に, の に C at the end of the field - variant に つ い detailed analytical を な line っ て た と こ ろ, こ が の field combining と RNA and ATP と の に both important な masato and を し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. Youdaoplaceholder0, recently bovine F_1 - ATPase の crystal structure が Ming ら か に さ れ た の で, こ れ を モ デ ル と し の て C at the end of the field - variant の う ち ATP binding energy に owe 陥 の あ る も の の - different parts を プ ロ ッ ト し て み る と, そ れ ら は, whole て ATP binding site の nearly position alongside に す る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の こ と は rho protein の ATP combining domain が F_1 - ATPase の そ れ と with others の three-dimensional structure を と る こ と を く and shown strong sucking す る. さ ら に, rho six quantity body は 従 to D_3 configuration を と る と exam え ら れ て い た が, こ れ は mistakenly り で あ り F_1 - ATPase と with others に C_6 said seaborne を と る こ と が in stopping さ れ た. The え え I 々が previously obtained the て る る ロスリ ロスリ ロスリ <s:1> the actual results of the <s:1> show that the と 々が are consistent with する.

项目成果

Miwa,Y.et al.: "Structural and functional dissection of transcription termination factor rho by random mutagenesis" Journal of Molecular Biology. (in press). (1995)

Miwa,Y.et al.：“通过随机诱变对转录终止因子 rho 进行结构和功能剖析”分子生物学杂志。