ポリオーマウイルスエンハンサーに結合する蛋白因子の精製と機能解析

多瘤病毒增强子结合蛋白因子的纯化和功能分析

• 批准号: 63015035
• 负责人: 重定 勝哉
• 金额: $ 2.82万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63015035/
• 关键词: ポリオーマウイルス; エンハンサー結合蛋白; ヘテロダイマー; DNA親和性クロマトグラフィー; 発癌遺伝子Ha-ras; NIH3T3細胞; トランスフォム細胞; DNAループ構造

Ha-ras発癌遺伝子でトランスフォームしたマウスNIH3T3細胞に特異的に出現するエンハンサー結合蛋白因子,PEBP3,をDNA親和性クロマトグラフィーおよび高速液体クロマトグラフィーの組合わせによって高度に精製することが出来た。分子的解析の結果,同因子は次のような特徴的性質を持つことが明らかとなった。(1)2種類のサブユニットαとβ,それぞれの分子量20-25Kおよび30-35K,からなるヘテロダイマーである。(2)αとβは共にDNA結合活性を持ちしかもその認識配列は全く同等である。従ってPEBP3は全体として2価の結合能を持ち,それによってDNAにループ構造を形成させる働きがあるものと考えられる。(3)ポリオーマウイルスエンハンサー上の中心的機能領域であるAおよびBエレメントの双方にほぼ同じ強さで特異的に結合する。前項の性質を考え合わせれば,本因子はポリオーマウイルスのDNA複製および遺伝子発現の制御に対して,従来予想されていた以上に重要な役割を果たすものと目される。(4)PEBP3の活性レベルおよび分子的性状は細胞分子化あるいは種々の発癌遺伝子の影響下に大きく変動する。これらの知見より,PEBP3は従来未知の新しい様式の制御機能を荷なう興味深い因子であることが明らかとなって来た。今後さらに本因子の生物学的役割を具体的に追究して行くために,精製標品をもちいてアミノ酸配列決定を進め,それを手がかりとして遺伝子クローニングを目指す予定である。

The Ha-ras cancer cell is sensitive to the specific protein factor, PEBP3, DNA, and DNA. The high-speed liquid sensor is sensitive to the high-speed liquid chromatography. The results of molecular analysis show that the sex of the same factor is different from that of the others. The molecular weight is 20-25K, the molecular weight is 30-35K, the molecular weight is 20-25K. (2) the binding activity of α-β-co-conjugated DNA was determined to be the same as that of the whole group. The whole PEBP3 system can be used to improve the performance, so that the DNA system can be used to improve the performance of the system. (3) to make sure that both parties have the same strength as each other in the field of mechanical energy of the upper center. The aforementioned sexual information tests are in combination with each other, and this factor is related to the DNA replication system. In order to improve the performance of the system, you may want to use the above important information to cut the results. (4) the characteristics of PEBP3 active protein molecules. The molecular weight of several kinds of cancer cells has been greatly increased under the shadow of tumor cells. Please be informed that PEBP3 has come to know that the new equipment control machine can have a profound effect on the flavor factor. In the future, we will make sure that this factor is used in biology. In the future, the specific information will be investigated, and the standard product will be determined to improve the performance of the system.

项目成果

Satake.M.: Oncogene. 3. 69-78 (1988)

Satake.M.：癌基因。