ヒト白血病AMLに関連する新しい転写因子ファミリーPEBP2の構造機能解析

与人类白血病 AML 相关的新转录因子家族 PEBP2 的结构功能分析

基本信息

批准号：
07272221
负责人：
重定勝哉
金额：
$ 2.56万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

転写因子PEBP2はDNA結合を担うαサブユニットおよびそれと会合してDNA結合を強めるβサブユニットからなるヘテロダイマーである.さらに,両サブユニットはいずれもその機能異常により類似の急性骨髄性白血病AMLをひきおこすことが明らかにされている.そこで本因子による発癌の機序を明らかにするために,その基礎として,αの機能的中核であるRuntドメインおよびその対となる分子機能特性について詳細なin vitro解析を進めた.その結果,αサブユニットのDNA結合活性はSH基の酸化還元を介する調節,即ちRedox制御を受けること,またその活性化状態はPEBP2α単独では非常に不安定であり数分以内に急速に失活することが分かった.βサブユニットはこの失活を防ぐとともに,DTTに対する濃度依存性を著しく軽減する効果を示した.βによるこの促進効果は,既知のDNA結合親和性上昇効果とは別個にかつそれと相乗して現れる.この発見により,βサブユニットの担う機能的意義に新しい側面が加えられた。,次いで,PEBP2αのRuntドメイン内に存在する2箇所のシステイン残基(Cys115,Cys124)のうち,どちらがRedox制御の標的となるかを決定するために,系統的な変異解析を行なったところ,両システイン残基は共に協調してRedox応答性を高めることが明らかとなった.これは従来Jun/FosやNF-kBなどで知られていた単一システイン残基によるRedox制御とは様相が異なることから,PEBP2αのRedox制御は新しいカテゴリーに属するものと考えられる.

转录因子PEBP2是一种异二聚体，由负责DNA结合的α亚基和与之相关的β亚基以增强DNA结合。此外，由于它们的功能异常，这两个亚基都被证明会引起相似的急性髓样白血病。为了阐明该因素引起的致癌作用机制，我们对Runt结构域（是α的功能核心及其成对的分子功能特性）有详细的解释。进行了体外分析。结果表明，α亚基的DNA结合活性受SH组的氧化还原介导的调控，即氧化还原调节，并且其激活态仅与PEBP2α单独使用，并且在几分钟内迅速失活。 β亚基可防止这种失活，并显着降低了对DTT的浓度依赖性。 β的这种启动子效应在已知的DNA结合亲和力增加效果上分别和协同作用。该发现为β亚基的功能意义增加了一个新方面。接下来，我们进行了系统的突变分析，以确定位于PEBP2α的Runt结构域中的两个半胱氨酸残基（Cys115和Cys124）中的哪个是氧化还原调节的靶标，并且发现两个半胱氨酸残基相协调以增加氧化还原响应。这与以前在JUN/FOS和NF-KB中已知的单一半胱氨酸残基的氧化还原调节不同，因此PEBP2α的氧化还原调节属于新类别。