rasシグナル伝達系の標的となる新しい核内制御因子の遺伝子クロ-ニングと機能解析

作为ras信号转导系统靶标的新型核调节因子的基因克隆和功能分析

基本信息

批准号：
03152064
负责人：
重定勝哉
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスの転写制御因子PEBP2は、初期胚細胞株では検出されず分化誘導にともなって発現すること、発ガン遺伝子Haーrasの影響下に蛋白燐酸化を介する機能修飾を受けることなどの観察から、細胞分化・癌化との関連が注目される。さらにこの因子は、2種類のサブユニットα・βからなるヘテロ2量体であり、その分子構成の機能的意義についても関心がもたれる。本研究では、これらの問いを追求するために2つのサブユニットに対するcDNAをクロ-ニングし、構造機能解析を行った。その結果、DNA結合機能を直接担うのはαサブユニットであり、βサブユニットはαとの会合を通じてDNA・蛋白複合体を安定化ないし機能修飾する役割を果たすことがまず判明した。さらにホモロジ-検索を行ったところ、αサブユニットがショウジョウバエの分節遺伝子の一つのruntと相同であることが分かった。αとruntはともに、ロイシンジッパ-・Znフィンガ-・ホメオボックスなど既知の構造モチ-フを持たないことから、これら二つで新しい独自のDNA結合蛋白ファミリ-を成するものと考えられる。この発見によりαを中核因子として含むPEBP2が発生・分化と重要な関わりを持つ可能性がますます強まった。その具体的役割の一端を示すものとして、PEBP2結合配列はマウス白血病ウイルスのエンハンサ-やTリンパ球レセプタ-遺伝子のエンハンサ-に普遍的に存在しそれら遺伝子のT細胞特異的発現に関与していることが示された。今後、本研究で得られた新知見および実験的基盤の上に立って、PEBP2の役割の全体像を系統的に追究して行く予定である。

在早期生殖细胞系中未检测到小鼠转录调节因子PEBP2之间的关联，并且与分化诱导结合表达，并且在致癌HA-RAS的影响下通过蛋白质磷酸化进行了功能修饰，并且它吸引了细胞分化与癌症之间的关系的注意力。此外，该因子是由两种类型的亚基α・β组成的异二聚体，而感兴趣也与其分子结构的功能意义有关。在这项研究中，克隆了两个亚基的cDNA，并进行了结构功能分析以提出这些问题。结果，首先发现α亚基直接通过与α结合来稳定或修饰DNA-蛋白质复合物。此外，同源搜索表明，α亚基与果蝇的分段基因之一Runt同源。 α和runt都不知道结构序列，例如亮氨酸拉链，Zn手指和同源蛋白，因此人们认为这两个构成了新的，独特的DNA结合蛋白家族。这一发现增加了包含α作为核心因素的PEBP2可能与开发和分化有关。已经表明，PEBP2结合序列普遍存在于鼠白血病病毒的增强子和T淋巴细胞受体基因的增强子中，并且参与了这些基因的T细胞特异性表达。将来，我们计划根据本研究中获得的新发现和实验基础，系统地追求PEBP2的整体作用。