意識下に自由行動するマウスを用いた青斑核ノルアドレナリン神経機能の解明
意識下に自由行動するマウスを用いた青斑核ノルアドレナリン神経機能の解明
批准号:
26890014
负责人:
山下 哲
金额:
$0.75万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份:
2014
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
2014-08-29 至 2015-03-31
中文摘要
本研究では、(1)無麻酔下かつ無拘下の動物個体における行動発現時の青斑核ノルアドレナリン(NA)神経活動を検出する方法の独自開発、(2)光遺伝学を用いて青斑核NA神経の活動のみを任意のタイミングで調節するin vivo実験系の立ち上げを計画していた。まず、ドパミン-β-水酸化酵素(DBH)プロモータを用いてDBH神経細胞特異的にtTA(テトラサイクリントランスアクチベータ)を発現するDBH-tTAマウス、およびtTA依存的に遺伝学的カルシウム蛍光プローブ(GCaMP6)、チャネルロドプシン2(ChR2)、アーキロドプシン(ArchT)を発現可能なマウス(TetO-GCaMP6マウス、TetO ChR2マウス、TetO ArchTマウス)を作成した。(1)において、皮質神経細胞にGCaMP6を発現させKClを作用させたところ、神経活動に伴うカルシウム応答をGCaMP6の蛍光変化により検出することに成功した。次に、オレキシン神経特異的にGCaMP6を発現させたマウスを作成し、そのマウスの尾部へ機械的な痛み刺激を与えたところ、刺激と呼応した蛍光変化を検出することに成功した。(2)においては、DBH-tTAマウスをTetO ChR2マウス、TetO ArchTマウスと交配させ、NA神経細胞特異的にChR2を発現させたマウス、ArchTを発現させたマウスをそれぞれ作成した。急性スライスを用いて、ChR2発現マウスにおいて青色光照射により神経活動が活性化すること、ArchT発現マウスにおいては緑色光照射によって神経活動が抑制されることを確認した。これらのことから、(1)で開発中のシステムにより、脳深部の神経活動がファイバーを介してin vivo条件下で検出できることが明らかとなった。
英文摘要
本研究では、(1)無麻酔下かつ無拘下の動物個体における行動発現時の青斑核ノルアドレナリン(NA)神経活動を検出する方法の独自開発、(2)光遺伝学を用いて青斑核NA神経の活動のみを任意のタイミングで調節するin vivo実験系の立ち上げを計画していた。まず、ドパミン-β-水酸化酵素(DBH)プロモータを用いてDBH神経細胞特異的にtTA(テトラサイクリントランスアクチベータ)を発現するDBH-tTAマウス、およびtTA依存的に遺伝学的カルシウム蛍光プローブ(GCaMP6)、チャネルロドプシン2(ChR2)、アーキロドプシン(ArchT)を発現可能なマウス(TetO-GCaMP6マウス、TetO ChR2マウス、TetO ArchTマウス)を作成した。(1)において、皮質神経細胞にGCaMP6を発現させKClを作用させたところ、神経活動に伴うカルシウム応答をGCaMP6の蛍光変化により検出することに成功した。次に、オレキシン神経特異的にGCaMP6を発現させたマウスを作成し、そのマウスの尾部へ機械的な痛み刺激を与えたところ、刺激と呼応した蛍光変化を検出することに成功した。(2)においては、DBH-tTAマウスをTetO ChR2マウス、TetO ArchTマウスと交配させ、NA神経細胞特異的にChR2を発現させたマウス、ArchTを発現させたマウスをそれぞれ作成した。急性スライスを用いて、ChR2発現マウスにおいて青色光照射により神経活動が活性化すること、ArchT発現マウスにおいては緑色光照射によって神経活動が抑制されることを確認した。これらのことから、(1)で開発中のシステムにより、脳深部の神経活動がファイバーを介してin vivo条件下で検出できることが明らかとなった。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
青斑核ノルアドレナリン神経機能の全解明
蓝斑去甲肾上腺素能神经元功能的完整阐明
DOI:
--
发表时间:
2014
期刊:
影响因子:
--
作者:
[市坪大将, 田中昌子, 髙橋克之, 泉康雄, 塩田正之, 岩尾洋, 三浦克之, IbrahimAA,Yahata T,Onizuka M,Dan T,Van Yperscle De Stribou C,Miyata T,Ando K, 山下 哲]
通讯作者:
山下 哲
Development of Mathematics Teaching Material Creation System for Hybrid Typed Classes to Support Students' Active Learning
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批准号:23K02752
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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资助金额:$2.0万
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财政年份:2023
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负责人:山下 哲
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依托单位:
脂質一重膜界面とゴムのダイナミクスによるゴム合成活性発現と分子量制御機構の解明
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批准号:22K19143
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项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
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资助金额:$3.99万
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财政年份:2022
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负责人:山下 哲
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依托单位:
Elucidation of mechanisms of depression related to autonomic response neural circuits
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批准号:20K06858
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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资助金额:$2.75万
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财政年份:2022
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负责人:山下 哲
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依托单位:
Understanding the core structures and dynamics of membrane protein complexes related in productions of valuable compounds from plants
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批准号:21H02115
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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资助金额:$11.4万
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财政年份:2021
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负责人:山下 哲
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依托单位:
ポリイソプレノイドの膜間反転現象の可視化による細菌毒素輸送酵素の探索
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批准号:17710177
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项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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资助金额:$1.79万
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财政年份:2005
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负责人:山下 哲
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依托单位:
中性大気-プラズマ結合に起因する沿磁力線電流季節変動異常の解明
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批准号:03J05024
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.15万
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财政年份:2003
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负责人:山下 哲
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依托单位:
脳ホスホリパーゼDのクローニングと機能解析
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批准号:10155204
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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资助金额:$0.96万
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财政年份:1998
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负责人:山下 哲
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依托单位:
脳におけるホスホリパーゼDの発現と活性調節
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批准号:09259205
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1997
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负责人:山下 哲
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依托单位:
ホスホリパーゼDを介する細胞増殖シグナリング
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批准号:07273210
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.47万
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财政年份:1995
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负责人:山下 哲
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依托单位:
脳のホスホリパーゼDシグナリングとシナプス形成の調節
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批准号:07278206
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.28万
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财政年份:1995
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负责人:山下 哲
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依托单位:
yas産物p21によるホスファチジルコリン代謝回転の促進とその分子機構
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批准号:04152018
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$3.01万
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财政年份:1992
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负责人:山下 哲
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依托单位:
rasタンパク質によるホスファチジルコリン代謝の調節
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批准号:03152021
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$2.75万
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财政年份:1991
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负责人:山下 哲
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依托单位:
真核生物の膜脂質生成にかかわる遺伝子の発現と調節
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批准号:63580147
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项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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资助金额:$0.83万
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财政年份:1988
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负责人:山下 哲
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依托单位:
酵母細胞におけるリン脂質の生合成とアセンブリー
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批准号:60214002
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项目类别:Grant-in-Aid for Special Project Research
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资助金额:$0.7万
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财政年份:1985
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负责人:山下 哲
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依托单位:
細胞増殖因子(EGF)によるHeLa細胞リン脂質合成酵素遺伝子の活性化
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批准号:60015011
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$3.52万
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财政年份:1985
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负责人:山下 哲
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依托单位:
酵母細胞におけるリン脂質の生合成とアセンブリー
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批准号:59222002
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项目类别:Grant-in-Aid for Special Project Research
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资助金额:$1.02万
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财政年份:1984
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负责人:山下 哲
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依托单位:
レシチン生合成の酵素の調節
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批准号:58480133
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项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
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资助金额:$4.16万
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财政年份:1983
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负责人:山下 哲
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依托单位:
レシチン生合成の酵素の調節
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批准号:X00090----557057
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项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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资助金额:$1.41万
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财政年份:1980
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负责人:山下 哲
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依托单位:
レシチン生合成の酵素の調節
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批准号:X00080----348118
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项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
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资助金额:$3.46万
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财政年份:1978
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负责人:山下 哲
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依托单位:
がん細胞におけるリン脂質の動態とポリアミンの役割
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批准号:X00021----301514
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项目类别:Grant-in-Aid for Cancer Research
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资助金额:$4.16万
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财政年份:1978
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负责人:山下 哲
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依托单位:
海外基金