リソソームでの核酸認識における核酸代謝系の役割についての研究

核酸代谢系统在溶酶体核酸识别中的作用研究

• 批准号: 16H02629
• 负责人: 三宅 健介
• 金额: $ 27.71万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16H02629/
• 关键词: 自然免疫; 免疫学

Toll-like Receptor (TLR)は病原体成分を認識するセンサーである。病原体由来核酸はTLRの主要なリガンドであるが、自己由来核酸もTLRを活性化し、多くの疾患の病態に関わる。TLRの自己核酸に対する応答は厳密に制御されていると考えられる。本研究ではリソソームにおける核酸応答制御機構をリソソームにおける代謝の観点から検討する。具体的には、核酸応答に重要な核酸プロセシング機構と自己核酸への応答を防ぐ核酸分解機構との関係について検討するとともに、TLR7を刺激する内因性RNA断片とヌクレオシドの同定、核酸認識における代謝センサーmTORの役割についての解析を進める。これらの解析を通して、リソソームにおける核酸認識と代謝系の相互作用の分子基盤解明を目指す。TLR8の構造生物学的解析からUridineがTLR8に結合すること、さらにレポーター細胞株を用いてTLR8の1重鎖RNAに対する応答をUridineが増幅することは既に報告している。TLR7については構造がまだわかっていないが、TLR7の1重鎖RNAに対する応答に及ぼすヌクレオシドの影響を調べた。NF-kB-Luciferaseを用いたレポーターアッセイでは、TLR7はUridineではなく、Guanosineと1重鎖RNA(PolyU)に強く応答した。また、マウス、ヒトのPlasmacytoid dendritic cells (pDCs)においても、TLR7の1重鎖RNAに対する応答がGuanosineによって増強された。精製したサル由来のTLR7タンパク質を用いて、結合実験を行ったところ、TLR7は単独ではGuanosineに結合しなかったが、1重鎖RNA存在下で有意な結合を示した。これらの結果は、GuanosineがTLR7の新たな内因性リガンドである可能性を示している。

Toll-like Receptor (TLR) するセ pathogen component を recognize するセ サ サ である. Pathogens origin nucleic acid は TLR の main な リ ガ ン ド で あ る が, their origin nucleic acid も TLR を activeness し, multiple く の の disease pathological に masato わ る. TLR tells one 's own nucleic acid に to する応 answer 厳 厳 secret に control されて ると ると test えられる. This study で は リ ソ ソ ー ム に お け る nucleic acid 応 system of a royal institution を リ ソ ソ ー ム に お け る metabolic の 観 point か ら beg す 検 る. Specific に は important な nucleic acids, nucleic acid 応 answer に プ ロ セ シ ン グ institutions と their nucleic acid へ の 応 answer を ぐ nucleic acid decomposition prevention agencies と の masato is に つ い て beg す 検 る と と も に, TLR7 を stimulus す る endogenous RNA fragment と ヌ ク レ オ シ ド の with fixed, nucleic acid に お け る metabolic セ ン サ ー mTOR の service cut に つ い て の parsing を into め る. <s:1> れら <s:1> analysis を understanding と metabolic system <e:1> interactions through <s:1> て and リソソ ムにおける ムにおける ムにおける nucleic acids and clarifying を target す molecular base plates. TLR8 の structural biology of parsing か ら Uridine が TLR8 に combining す る こ と, さ ら に レ ポ ー タ ー cell lines を with い て TLR8 の 1 heavy lock RNA に す seaborne る 応 answer を Uridine が rights of す る こ と は に report both し て い る. TLR7 に つ い て は tectonic が ま だ わ か っ て い な い が, TLR7 の 1 heavy lock RNA に す seaborne る 応 a に and ぼ す ヌ ク レ オ シ ド の influence を adjustable べ た. NF - kB - Luciferase を with い た レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ で は, TLR7 は Uridine で は な く, Guanosine と 1 heavy lock RNA (PolyU) strong に く 応 answer し た. ま た, マ ウ ス, ヒ ト の Plasmacytoid dendritic cells (pDCs) に お い て も, TLR7 の 1 heavy lock RNA に す seaborne る 応 answer が Guanosine に よ っ て raised strong さ れ た. Refined し た サ ル origin の TLR7 タ ン パ ク qualitative を with い て, combined be 験 を line っ た と こ ろ, TLR7 は 単 alone で は Guanosine に combining し な か っ た が, 1 heavy lock で intentionally な combining を and shown in the presence of RNA し た. The <s:1> れら <s:1> results る and the possibility of a new たな endogenicity of GuanosineがTLR7 <e:1> を suggest that を て る る る る る る る る る る る る る て る る る.

项目成果

Guanosine and its modified derivatives are endogenous ligands for TLR7.

• DOI: 10.1093/intimm/dxv062
• 发表时间: 2016-05
• 期刊: International immunology
• 影响因子: 4.4
• 作者: Takuma Shibata;U. Ohto;S. Nomura;K. Kibata;Y. Motoi;Yan Zhang;Y. Murakami;Ryutaro Fukui;T. Ishimot

Type I IFN Contributes to the Phenotype of Unc93b1D34A/D34A Mice by Regulating TLR7 Expression in B Cells and Dendritic Cells

• DOI: 10.4049/jimmunol.1500071
• 发表时间: 2016-01-01
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Fukui, Ryutaro;Kanno, Atsuo;Miyake, Kensuke
• 通讯作者: Miyake, Kensuke