权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Tollファミリー分子による病原体認識機構の解明とそれを応用した癌免疫療法の開発

阐明Toll家族分子的病原体识别机制以及利用其开发癌症免疫疗法

基本信息

批准号：
13214083
负责人：
三宅健介
金额：
$ 1.98万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214083/
关键词：
RP105 MD-1 MD-2 Toll-like receptor LPS

项目摘要

グラム陰性菌の膜成分リポ多糖(LPS)を免疫細胞が認識する機構についての解析を進めた。LPSはToll-like Receptor4(TLR4)と我々が発見したTLR4会合分子MD-2による複合体TLR4/MD-2によって認識されることを我々は昨年報告した。本年はTLR4/MD-2のプロトタイプであり、我々が発見したRP105/MD-1複合体のLPS認識における役割をノックアウトマウスを用いて検討した。RP105ノックアウトマウスのB細胞は問題なく産生され、分化し、B細胞レセプター、CD40を介するシグナルには異常は認められなかったが、LPS刺激による増殖反応と抗体産生反応において低応答性を示した。低応答性のメカニズムを細胞株を用いて検討したところ、TLR4/MD-2とRPl05/MD-1が、B細胞におけるLPS認識において機能的に協力していることが明らかになった。TLR4は単独ではLPSを認識できず、MD-2が会合したTLR4/MD-2複合体になって初めてLPSを認識できる。MDタンパクはLPS認識に重要な役割を果たしている。このMDタンパクの機能解析を進め、以下の成果を得た。1.MDタンパクの役割を明らかにするために、昨年度のRP105ノックアウトマウスに続いてMD-1ノックアウトマウスを作成し、その解析を行った。またその解析のためにマウスMD-1に対するモノクローナル抗体も作製した。RPl05欠損B細胞はLPS低応答性を示すが、MD-1欠損B細胞も同様なLPS低応答性を示した。そこで、MD-1欠損B細胞の細胞表面でのRP105、MD-1の発現を調べてみると、MD1ばかりでなく、RP105の発現も検出できなかった。すなわち、MD-1がRPl05の細胞表面への発現に必須の分子である事が明らかになった。2.MD-2の機能解析としてlipid A誘導体を用いた実験を行った。Lipid IVaはLipid Aの誘導体であり、マウスにはアゴニストとして、ヒトにはアンタゴニストとして作用する。この種特異的な薬理作用がTLR4によって規定されるのか、MD-2によって規定されるのか検討するためにマウスTLR4/ヒトMD-2のキメラ複合体を発現する細胞株を確立し、LipidIVaに対する応答性を検討したところ、ヒトと同様にLipidIVaは拮抗剤として作用した。MD-1がRP105の発現に必須であることをノックアウトマウスを用いて示した。MD-2においても同様である可能性があり、MDタンパクはTLRの発現に重要な役割を果たしている可能性がある。さらにMDタンパクはTLR4によるLPS認識に必須の分子であることをLipid IVaを用いて示した。LipidIVaの結果はTLR4によるLPS認識の微妙な特異性がMD-2によって影響されることを示しており、TLR4のエンドトキシン認識にMD-2が直接関わっていることを示唆している。これらの結果は癌免疫療法のために免疫賦活剤を開発するうえで、TLRばかりでなくMDタンパクも標的分子となりうることを示唆している。

The membrane component of negative bacteria, polysaccharide (LPS), is recognized by immune cells. LPS Toll-like Receptor4(TLR4) is a molecular complex of TLR4 and MD-2. This year, we found that the TLR4/MD-2 complex was recognized by LPS. RP105-induced B cell proliferation, differentiation, CD40-mediated B cell proliferation, and LPS-induced antibody production. The low response rate of LPS in B cell line was detected by TLR4/MD-2 and RP105/MD-1. The low response rate of LPS in B cell line was detected by LPS in B cell line. TLR4 is the only one that recognizes LPS, MD-2 is the only one that meets TLR4/MD-2. MD is the first to recognize the importance of LPS. The function analysis of this MD file is advanced, and the following results are obtained. 1. The analysis of MD-1 and RP-105 in the past year The analysis of the MD-1 antibody RP105 defective B cells showed low LPS responsiveness, and MD-1 defective B cells also showed low LPS responsiveness. RP105, MD-1, MD-1 The molecular components necessary for the development of RP105 cell surface proteins such as MD-1 and RP105 are clearly identified. 2. MD-2's function analysis and lipid A inducer are used in the process. Lipid IVa is an inducer of Lipid A. This species-specific regulatory action was identified in TLR4/MD-2 cell lines, and was identified as a LipidIVa antagonist. MD-1 RP105 must be used for development. MD-2 has the same probability of occurrence as MD-2 and the same probability of occurrence as MD-2. TLR4 is a necessary molecule for LPS recognition. The results of LipidIVa show that LPS recognition is subtly specific to MD-2 recognition, and that LPS recognition is directly related to MD-2 recognition. The results of this study are as follows: 1. The development of immunoactivating agents in cancer immunotherapy; 2.