環境変異原と重金属化合物との相互作用によるヒト遺伝子損傷と複合汚染における意義

环境诱变剂和重金属化合物之间的相互作用对人类遗传损伤和复杂污染具有重要意义

• 批准号: 03202229
• 负责人: 川西 正祐
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03202229/
• 关键词: 環境変異原; 重金属化合物; ヒト遺伝子損傷; 複合汚染; ニッケル化合物; 3-ヒドロキシアントラニル酸; 過酸化水素; Cu(II); 太陽光; 紫外線; ras遺伝子; 点突然変異; 皮膚腫瘍

本研究の目的はAmesテスト陰性の発がん物質と金属との相互作用によりヒト偉伝子が損傷される機構を解明することである。本年度は種々のニッケル化合物、およびトリプトファン代謝物の一つである3-ヒドロキシルアントラニル酸(3-HAA)を選び、DNA分子レベルおよび細胞レベルでヒト偉伝子損傷を検討した。細胞レベルでのDNA損傷はパルスフィールドゲル電気泳動を行ない測定した。ニッケル化合物(1)ヒト培養細胞(Hela、Raji細胞)を硫化ニッケル(NIS、Ni_3S_2)で処理すると二本鎖DNA切断が認められた。アルカリ処理でDNA切断が増加することから、一本鎖DNA切断も推定された。(2)カタラーゼ阻害剤、GSH合成阻害剤やGSH消去剤で、NiSによる二本鎖DNA切断が増加したことから、過酸化水素の関与が示唆された。(3)Ni_3S_2で処理したHeLa細胞では8-OH-dGが有意に増加した。このことは我々がin vitroで明かにした酸素ラジカルによるDNA損傷が細胞内でも起こる可能性を示している。3-HAA(1)3-HAAはCu(II)の存在下でDNA切断をもたらした。カタラーゼとバソキュプロインの添加によりDNA損傷が抑制されることから、H_2O_2とCu(I)の関与が示された。OHラジカル捕捉剤による抑制は少くな、HOラジカルがDNA損傷に果たす役割は小さいと考えられる。(2)3-HAAにMn(II)を加えた後Cu(II)を加えたDNAの方がMn(II)のない場合に比べてDNA損傷が大きかった。(3)3-HAAはCu(II)の存在下でcalf thymus DNA中の8-OHdGを増加させた。3-HAAとCu(II)から生じたH_2O_2とCu(I)から活性酸素が生成しDNAを損傷することが示唆された。Mn(II)はH_2O_2の生成を促進すると考えられる。

The purpose of this study is to clarify the mechanism of damage caused by the interaction of metal and substance. This year, we have been investigating the effects of 3-HAA, DNA molecule and cell damage on the development of new compounds, metabolites and other biological agents. Cell DNA damage is measured by electrophoresis. Compound (1): Cultured cells (Hela, Raji cells) were treated with NIS and Ni_3S_2, which resulted in DNA cleavage. The DNA cleavage process is expected to increase in size and size, and the DNA cleavage is expected to increase in size and size. (2)GSH synthesis inhibitor, GSH elimination inhibitor, NiS inhibitor, DNA cleavage inhibitor, hyperacidification inhibitor and inhibitor (3)Ni HeLa cells treated with_3S_2 were intentionally enhanced with 8-OH-dG. The possibility of DNA damage arising in vitro was demonstrated. 3-HAA(1)3-HAA (1)3-HAA ( The relationship between H_2O_2 and Cu(I) and the inhibition of DNA damage was studied. OH capture agents inhibit DNA damage, HO capture agents inhibit DNA damage, and HO capture agents inhibit DNA damage. (2) When Mn(II) is added to 3-HAA, Cu(II) is added to DNA, and Mn(II) is added to DNA, DNA damage is greater than that of Cu (II). (3) 8-OHdG in calf thymus DNA increased in the presence of 3-HAA and Cu(II). 3-HAA + Cu(II)+ H2O2 + Cu(I)+ H2O2 + Cu(II)+ Cu(I)+ Cu (II)+ Cu (II)+ Mn(II) promotes the formation of H_2O_2.

项目成果

K.Ito: "Manganese Mediated Oxidative Danage of Cellular and Isolated DNA by Isoniazid and Related Hydrazines:Non Fenton Yype Hydroxyl Radical Formation" Biochemistry. 31. 11606-11613 (1992)

K.Ito：“异烟肼和相关肼对细胞和分离 DNA 的锰介导氧化损伤：非芬顿 Yype 羟基自由基形成”生物化学。

K.Yamamoto: "Enhancenent and Alteration of Bleamycin-catalyzed Site-specific DNA Cleavage by Diotamycin and Same Minor Groove Binders." Biochemical and Biophysical Research Communications. 183. 292-299 (1992)

K.Yamamoto：“通过 Diotamycin 和相同的小凹槽结合剂增强和改变博霉素催化的位点特异性 DNA 切割。”

S.Inoue: "Caffeic Acid Causes Metal dependent Damage to Cellhar and Isolated DNA through H^2O^2 Formation." Carcinogenesis. 13. 1497-1502 (1992)

S.Inoue：“咖啡酸通过 H^2O^2 的形成对 Cellhar 和分离的 DNA 造成金属依赖性损伤。”

S.Kawanishi: "Active Oxygens,Lipid Peroxide and Antioxidnats Vol.2" Elsevier Science Publishing Co.Inc., 4 (1992)

S.Kawanishi：“活性氧、过氧化脂质和抗氧化剂第 2 卷”Elsevier Science Publishing Co.Inc.，4 (1992)

K.Yamamoto: "Concerted DNA Recognition and Novel Site specific Alkylation by Dnocarmycun A with Distamycin A." Biochemistry. 32. 1059-1066 (1993)

K.Yamamoto：“Dnocarmycun A 与偏霉素 A 进行协同 DNA 识别和新型位点特异性烷基化。”