単一遺伝子病における組織特異的発現異常の研究

单基因疾病组织特异性表达异常的研究

• 批准号: 03265213
• 负责人: 服巻 保幸
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03265213/
• 关键词: NADHcytochoromeb5還元酵素(b5R); 変異; 組織特異性; PCR; チアノ-ゼ; 精神発達遅延

遺伝子病における遺伝子の組織特異的な発現異常の機構を明らかにするために主に赤血球を病態の場とする疾患に関わるグロビン遺伝子、NADHcytochoromeb5還元酵素(b5R)遺伝子、さらband4.2遺伝子を対象に研究を行なっているが、今年度は主に遺伝性メトヘモグロビン血症について解析を行なった。本疾患はb5Rの欠損で起きる常染色体劣性の疾患であり、赤血球のみで欠損が見られチアノ-ゼを伴うtypel、そして種々の組織で欠損が見られ精神発達遅延を来たすtypeII,そして血球でのみ欠損が見られるtypeIIIが知られている。まずtypeIIについてはcosmid vectorで全遺伝子を運ぶクロ-ンを単離して解析を行ない、codom127にTーC置換(SerーPro)を認めた。この変異によるNADHへの結合能の低下が推測された。typeI,typeIIについてはPCRによるdirect sequencingおよびdirect cloningによる解析を行なった。その結果typeIではコドン57にGーA置換(ArgーG1n)を認めた。typeIIIではコドン148にTーC置換(LeuーPro)が見られた。typeIではresidue32はαーhelixとβーsheetとの間に位置しており、置換でenzymeのconformationが変化しinstabityを来たすのではないかと考えられる。typeIIIではprolineへの置換のためにβーsheetの破壊が考えられるが、これまで報告されているFADーやNADH結合motifの領域から外れており、この置換ではmildな機能変化にとどまり、神経細胞における障害が軽微なのではないかと考えられた。今後各種細胞へ遺伝子を導入し、変異酵素の振る舞いを検討する予定である。

Pathogenesis of disease, histomorphology, and tissue-specific abnormalities in the development of histomorphology. Pathogenesis of disease, histomorphology, and diseases related to histomorphology, histomorphology, and diseases related to histomorphology, histomorphology, and histomorphology. The disease is caused by the deficiency of b5R, autosomal impairment of red blood cells, type II, typel III and typel III. Type II is a cosmid vector. It is a complete vector. It is a codom127. It is a C substitution. The binding energy of NADH was estimated to be low. typeI,typeII: PCR, direct sequencing, and direct cloning. As a result, typeI is recognized as G − A substitution (Arg − G1n). Type III is a T-C replacement (Leu-Pro). typeI is a residue32. The position between alpha helix and beta sheet is changed, and the enzyme conformation is changed. Type III: The substitution of proline for β-sheet is reported in the field of NADH binding motif. In the future, the introduction of various cellular proteins and the vibration of different enzymes will be discussed.

项目成果

Fukumaki,Y.: "Generation and spread of globin gene mutations in population:βーthalassemia in Asian countries." New Aspects of the Genetics of Molecular Biology. 153-176 (1991)

Fukumaki, Y.：“珠蛋白基因突变在人群中的产生和传播：亚洲国家的β-地中海贫血。”《分子生物学遗传学新方面》153-176 (1991)。

Kobayashi,Y.: "Serineーproline replacement at residue 127 of NADHーcytochrome b5 reductase causes hereditary methemoglobinemia,gemeralized type." Blood. 75. 1408-1413 (1990)

Kobayashi, Y.：“NADH-细胞色素 b5 还原酶残基 127 处的丝氨酸-脯氨酸替换导致遗传性高铁血红蛋白血症，泛化型血液。”75. 1408-1413 (1990)

Yubisui,T.: "Stuuctural role of serine 127 in the NADHーbinding site of human NADHーcytochrome b5 reductase." J.Biol.Chem.266. 66-70 (1991)

Yubisui, T.：“丝氨酸 127 在人 NADH-细胞色素 b5 还原酶的 NADH 结合位点中的结构作用。J.Biol.Chem.266 (1991)。

Katsube,T.: "Exonic point mutations in NADHーCytochrome b5 reductase genes of homozygotes for hereditary methemoglobinemia,typeI and typeIII:Putative mechanisms of tissueーdependent enzyme deficiency." Am.J.Human.Genet.48. 799-808 (1991)

Katsube, T.：“遗传性高铁血红蛋白血症 I 型和 III 型纯合子的 NADH-细胞色素 b5 还原酶基因的外显子点突变：组织依赖性酶缺乏的推定机制。799-” 808（1991）

Fucharoen,S.: "Double heterozygosity of the βーMalay and a novel βーthalassemia gene in a Thai patient." Am.J.Hematol.38. 142-144 (1991)

Fucharoen, S.：“泰国患者的 β-马来基因和新型 β-地中海贫血基因的双重杂合性。Am.J.Hematol.38 (1991)。