B細胞シグナル伝達機構の解析

B细胞信号转导机制分析

• 批准号: 04253232
• 负责人: 阪口 薫雄
• 金额: $ 5.63万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04253232/
• 关键词: B細胞; 抗原レセプター; MB-1; シグナル伝達; アポトーシス; トレランス; lgR結分分子

これまでの研究計画においてB細胞抗原受容体は、IgM分子とこれに結合するMB-1/B29を核とする複合体構造をしていることを示してきた。またMB-1分子の細胞内ドメインが抗原の刺激を細胞内、核内へと伝達する機能分子であることが明らかにされてきた。更に、この複合体からのシグナル伝達分子を明らかにすることを目的とし、本年度は、MB-1分子に結合するリン酸化タンパクp52を見出し、この分子のcDNAクローニングを行いタンパク構造、アミノ酸シークエンスの解析に踏み込んだ。p52はPMAによるPKC活性化によってそのリン酸化が誘導され、IgM、MB-1タンパクとコンプレックスとして共沈してくる。この分子に対する特異的なモノクローナル抗体(19-14)を作成し、タンパク性質、発現、細胞内でのチロシンリン酸化酵素との関連を解析した。λgt11-ベクターにタンパク発現させるcDNAライブラリーを作成し、19-14抗体によるスクリーニングを行った。その結果、α4cDNAクローンを単離し、この遺伝子のコードするタンパクをグルタチオンs-トランスフェラーゼとの融合タンパクとして作らせ、免疫学的に同一の抗原性を有することを示した。α4遺伝子のシークエンスを行い、推定アミノ酸解析を決定した。コンピューターによるホモロジー検索を行ったところ、これまでに報告されていない新しい遺伝子であることが確認された。

This research project shows the structure of the MB-1/B29 nuclear complex in which B cell antigen receptors and IgM molecules bind. MB-1 molecule is a functional molecule that is stimulated by intracellular and nuclear proteins. In addition, this year, MB-1 molecule binding protein p52 was discovered, and the cDNA sequence of this molecule was analyzed p52 is activated by PMA, and is activated by p52. IgM and MB-1 are activated by p52 and co-precipitated by p52. Analysis of the relationship between the production, characterization, development, and intracellular acidification of these molecular-specific antibodies (19-14).λgt11-cDNAs are produced in the presence of the 19-14 antibody. The results showed that α 4 cDNA fragments were isolated, and the fusion proteins were isolated and identified in immunology.α4-amino acid analysis This is the first time I've ever seen you.

项目成果

Ishihara,K.: "Multiple B29 containing complexes on murine B lymphocytes.Common and stage restricted Ig-associated polypeptide chains." J.Immunol.150. 2253-2262 (1993)

Ishihara,K.：“鼠 B 淋巴细胞上含有多个 B29 复合物。常见和阶段限制性 Ig 相关多肽链。”

Sakaguchi,N.: "Immunoglobulin receptor(IgR)-associated molecules." Advances in Immunology. 54. 337-392 (1993)

Sakaguchi,N.：“免疫球蛋白受体（IgR）相关分子。”

Kudo,A.: "The expression of the mouse VpreB/【lambda bar】5 locus in transformed cell lines and tumors of the B lineage differentiation pathway." Int.Immrnol.4. 831-840 (1992)

Kudo, A.：“小鼠 VpreB/【lambda bar】5 位点在 B 谱系分化途径的转化细胞系和肿瘤中的表达。”Int.Immrnol.4 (1992)。

Matsuo,T.: "Crosslinking of B cell receptor-related MB-1 molecule induces the protein tyrosine phosphorylation in early B lineage cells." J.Immunol.

Matsuo,T.：“B 细胞受体相关 MB-1 分子的交联可诱导早期 B 谱系细胞中的蛋白质酪氨酸磷酸化。”

Kuwahara,K.: "Induction of tyrosine phosphorylation in human B lineage cells by crosslinking MB‐1 molecule of B cell receptor‐related heterodimer complex." Biochem.Biophys.Res.Commun.197. 1563-1569 (1993)

Kuwahara, K.：“通过交联 B 细胞受体相关异二聚体复合物的 MB-1 分子诱导人 B 谱系细胞中的酪氨酸磷酸化。”Biochem.Biophys.Res.Commun.197（1993）。