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パラミクソウイルスの転写複製信号の解析

副粘病毒转录复制信号分析

基本信息

批准号：
04271202
负责人：
塩田達雄
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

パラミクソウイルスは一本鎖で直線状のマイナス鎖RNAをゲノムとし感染細胞内で、capとpolyaのついた5つのmRNAとプラス鎖の全長RNAを合成する。ゲノムRNAの転写及び複製のためにはウイルスのRNAポリメレースの2つのsubunit(LとP)、及び鋳型となるゲノムRNAとそれを包装するヌクレオカプシド蛋白質(NP)が要求される。本研究はパラミクソウイルスの転写及び複製のための上記の因子群間の相互作用の分子的実態を明かにする事を目的とする。このため本年度は以下の研究を行った。(a)パラミクソウイルスのセンダイウイルス(HVJ)とパラインフルエンザ3型ウイルス(PIV3)は近縁のウイルスであり、NPは60%、Pは20%、Lは60%のアミノ酸が保存されている。そこで、これらの2つのウイルスの間の、NP、P、及びLの機能互換性を検討した。NPとゲノムRNAの複合体(RNP)を細胞に導入し、LやPを別々に細胞に供給する細胞内再構成系を用いた実験結果からは、2つのウイルスの間でLやPの機能互換性は認められなかったが、HVJの欠損干渉性ゲノムは、PIV3のウイルス蛋白質により子孫ウイルス中に包装され得た。これらの結果から、NPとLやPとの相互作用にはこれらのウイルス間で機能互換性がないが、ゲノムRNAとNP、P、あるいはLとの相互作用にはウイルス間で機能互換性が存在する事がわかる。(b)HVJの粒子内には、約2500分子のNP、約500分子のP、約50分子のLが存有し、ウイルス感染細胞内でもこれらの蛋白質はほぼ同じ割合で合成される。そこでワクシニアウイルスベクターを用いてNP、P、あるいはLを過剰発現させ感染細胞のNP、P、及びLの量的割合を変化させウイルスの転写複製に及ぼす影響を調べた。その結果、過剰発現したNPとLがHVJの感染直後のウイルスの転写を強く阻害する事が明かになった。

The linear RNA of the cap and polya lock must be used to infect cells, and the full-length RNA of the cap and polya lock can be synthesized. 2 subunits (L and P) of RNA transcription and replication, and 2 subunits (NP) of RNA transcription and replication are required. The purpose of this study is to clarify the molecular state of interaction between the two groups of factors This year's research is conducted in the following ways: (a)In the case of HVJ (HVJ) and PIV3 (PIV3), NP is 60%, P is 20%, L is 60% and the acid is preserved. The functional interchangeability of NP, P, and L is discussed. NP and RNA complexes (RNP) are introduced into cells, L and P are supplied to cells separately, and intracellular recombination systems are used. As a result, the functional interchangeability of L and P in cells is recognized, and the poor performance of HVJ in cells and PIV in cells is packaged. As a result, functional interchangeability exists between RNA and NP, P and L in the interaction between RNA and NP, P and L. (b)HVJ particles contain about 2500 molecules of NP, about 500 molecules of P, and about 50 molecules of L. The expression of NP, P and L in infected cells was modified by the expression of NP, P and L in the cells and by the expression of NP, P and L in the cells. As a result, the virus has been detected and the virus has been detected.