哺乳類細胞のDNA複製に関与するDNAヘリカーゼの分子遺伝・生化学的研究
参与哺乳动物细胞 DNA 复制的 DNA 解旋酶的分子遗传学和生化研究
基本信息
- 批准号:05249206
- 负责人:
- 金额:$ 1.15万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
近年、SV40 DNAのcell-free複製系が開発され、哺乳類細胞のDNA複製に関与する多くの酵素・蛋白の役割が解析され、哺乳類細胞のDNA複製機構の基本的理解が大きく進展した。しかしながら、SV40のT抗原が複製開始蛋白であり、また、DNAヘリカーゼでもあるため、この系を用いては哺乳類細胞のDNA複製開始蛋白とDNAヘリカーゼの同定は不可能であり、哺乳類細胞のDNA複製の研究にこれらの蛋白の同定という課題が残されていた。そこで我々は、マウスFM3A細胞のDNA合成の温度感受性変異株を分離し、DNAヘリカーゼが温度感受性になっている変異株をスクリーニングすることにより、DNA複製に関与するDNAヘリカーゼの同定を試みた。その結果、我々がDNAヘリカーゼBと名づけたヘリカーゼが変異している可能性のあるtsFT848株を見いだした。この変異株の細胞を非許容温度で培養するとDNA合成が速やかに低下するが、RNA合成、蛋白合成の速やかな低下は観察されなかった。このDNA合成の低下とDNAヘリカーゼBのDNA依存性ATPase活性の低下とが相関していた。DNAファイバーオートラジオグラフィーによる解析から、DNA合成の低下は個々のレプリコンにおけるDNA複製の開始の阻害による可能性が示唆された。さらに、野生株とtsFT848株細胞のDNAヘリカーゼBを部分精製し、その温度感受性を調べたところ、tsFT848細胞のDNAヘリカーゼBのDNA依存性ATPase活性、DNAヘリカーゼ活性とも野生株の活性に比べ、温度感受性になっていた。以上より、DNAヘリカーゼBが哺乳類細胞のDNA複製に関与するDNAヘリカーゼである可能性が示唆された。
In recent years, the basic understanding of SV40 DNA cell-free replication, mammalian DNA replication, mammalian cellular DNA replication and mammalian cytosolic DNA replication has been greatly improved. It is not possible to copy the proteins of DNA 40 T antigen, SV40 T antigen, DNA cells, mammalian cells, DNA cells, mammalian cells and mammalian cells. The temperature sensitivity of DNA synthesis was isolated, the temperature sensitivity of DNA was isolated, the temperature sensitivity was isolated, the temperature was isolated, the temperature sensitivity was isolated, The result of the test, we DNA
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kimura,K.: "Growth state-and cell cycle-dependent fluctuation in the expression of two forms of DNA topoisomerase II and possible specific modification of the higher molecular weight form" Journal of Biological Chemistry. 269(in press). (1994)
Kimura,K.:“两种形式的 DNA 拓扑异构酶 II 表达的生长状态和细胞周期依赖性波动以及较高分子量形式的可能的特异性修饰”《生物化学杂志》。
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- 影响因子:0
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Mori,M.: "Characterization of DNA synthesis at a restrictive temperature in the temperature-sensitive mutants,tsFT5 cells that belong…" Journal of Biological Chemistry. 268. 16803-16809 (1993)
Mori, M.:“温度敏感突变体 tsFT5 细胞在限制性温度下的 DNA 合成特征……”《生物化学杂志》268. 16803-16809 (1993)。
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Seki,M.: "Purification of two DNA-dependent adenosinetriphosphatases having DNA helicase activity from HeLa cells and comparison of the properties of the two enzymes." Journal of Biochemistry. (in press). (1994)
Seki,M.:“从 HeLa 细胞中纯化两种具有 DNA 解旋酶活性的 DNA 依赖性腺苷三磷酸酶,并比较这两种酶的特性。”
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