老化脳における神経栄養因子の濃度とその調節機構に関する研究

衰老脑神经营养因子浓度及其调控机制研究

• 批准号: 05261217
• 负责人: 仙波 りつ子
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05261217/
• 关键词: ニューロトロフィン-3; 酵素免疫測定法; ペプチド抗体

本年度は、ニューロトロフィン-3(NT-3)の酵素免疫測定系を確立するために以下のことを行なった。1.NT-3は抗原として多量に得ることができないだけでなく、種差がないためタンパクに対する抗体を得ることができない。そこで、NT-3のペプチド抗体作製を試みた。NT-3の多抗原性ペプチド(3カ所)とC末端のペプチドを合成し、ウサギに免疫し、大量の抗血清を得た。2.NT-3特異抗体の精製に必要な抗原を、ヒトNT-3のcDNAを組み込んだCHO-N1/N2の培養上清から、S-セファロースおよびセファクリールS-100カラムによって精製した。3.NT-3標品をカップリングさせたセファロースCL-6Bのアフィニティカラムを調整し、抗血清中のNT-3特異抗体の精製を用いて行なった。4つのペプチドのうち、3つに対して特異抗体が得られた。4.得られた精製抗体を、常法にしたがって、beta-D-ガラクトシダーゼでラベルし、NT-3をスタンダードとして、酵素免疫測定を行なった。特異抗体が得られても、特にペプチド抗体の場合には酵素免疫測定系確立に有用でないことがしばしばある。現在のところ、C末端に対する抗体が酵素免疫測定法に使用可能であることが分かったが、測定系確立までにはいたっていない。

This year, the enzyme immunoassay system for NT-3 was established. 1. NT-3 antigen-specific antibodyそこで、NT-3のペプチド抗体作制を试みた。NT-3 has multiple antigenicity, C-terminal antigenicity and antiserum. 2. The antigen necessary for the purification of NT-3 specific antibodies is extracted from the culture supernatant of CHO-N1/N2, and the NT-3 cDNA is extracted from the S-Seifaka and Seifaka S-100 libraries. 3. NT-3 standard sample is prepared by adjusting the concentration of CL-6B and NT-3 specific antibody in antiserum. 4. The specific antibody is obtained by selecting the target and 3. 4. To obtain purified antibodies, regular methods, beta-D-isoforms, NT-3 isoforms, enzyme immunoassays Specific antibodies are useful in establishing enzyme immunoassay systems. Now the C-terminal antibody is used in the enzyme immunoassay.

项目成果

Katoh-Semba,R.: "Core proteins of soluble chondroitin sulfate proteoglycans purified from the rat brain block the cell cycle of PC12D cells" Journal of Cellular Physiology. 156. 17-33 (1993)

Katoh-Semba,R.：“从大鼠脑中纯化的可溶性硫酸软骨素蛋白聚糖的核心蛋白可阻断 PC12D 细胞的细胞周期”《细胞生理学杂志》。

Katoh-Semba,R.: "An acceleration of age-related increases in levels of the b-subunit of nerve growth factor in selected tissues from senescence-accelerated mice(SAM-P/8)" Journal of Molecular Neuroscience. 4. 107-115 (1993)

Katoh-Semba,R.：“衰老加速小鼠 (SAM-P/8) 的选定组织中神经生长因子 b 亚基水平与年龄相关的增加加速”《分子神经科学杂志》。

Ariga,T.: "Activation of UDP-galactose:glocotriaosylceramide al-3-galactosyltransferase during PC12D cell differentiation induced by galactosylceramide" Biochemistry. 32. 7904-7908 (1993)

Ariga,T.：“半乳糖神经酰胺诱导的 PC12D 细胞分化过程中 UDP-半乳糖的激活：糖三糖神经酰胺 al-3-半乳糖基转移酶”生物化学。

Katoh-Semba,R.: "Regulation by androgen of levels of the b-subunit of nerve growth factor and its mRNA in selected regions of the mouse brain" Journal of Neurochemistry. (1994)

Katoh-Semba,R.：“雄激素对小鼠大脑选定区域神经生长因子 b 亚基及其 mRNA 水平的调节”《神经化学杂志》。