卵アレルギー患者における卵白アルブミンに対するT細胞の認識機構に関する研究

鸡蛋过敏患者T细胞对卵清蛋白的识别机制研究

基本信息

批准号：
05272203
负责人：
河野陽一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

食物アレルギーの発症におけるT細胞の役割を明らかにする目的で、卵アレルギーの主要アレルゲンであるovalbumin(OVA)に特異的なT細胞株を樹立し、これらT細胞株の認識するOVAのエピトープ、HLA拘束分子およびOVA刺激によるサイトカイン産生能を解析した。この研究により以下の結果を得た。1)卵白に対するRASTスコアが2以上の卵アレルギー患者5名から計29株のOVA特異的T細胞株を樹立した。2)これらT細胞株のOVA認識におけるHLA拘束分子について検索したところ、HLA-DR分子が主要な拘束分子であることが示唆された。3)今回樹立したOVA特異的T細胞株のうちE002株についてさらに解析を行なった。E002株は、抗HLA抗体によるOVAに対する芽球化反応阻害試験より、HLA-DR拘束性であることが示された。そこで、患者のHLA-DR抗原をtransfectしたマウス線維芽細胞を抗原提示細胞として用いた芽球化反応を行い、E002株のOVA認識に関わるHLA分子はHLA-DR10であることが決定された。4)E002株が認識するOVA抗原決定基を明らかにするために、4つのOVA部分合成ペプチドを作製した。OVAならびにOVA部分合成ペプチドに対する芽球化反応の結果から、E002株が認識するOVA抗原決定基がOVA323-339ペプチド上に存在することが判明した。5)E002株がOVA刺激により培養上清中に産生するサイトカインを測定したところ、IL-2、IL-4、IFN-γは産生しなかったがIL-5を多量に産生していた。IL-5は好酸球を活性化することより、OVA323-339を認識するT細胞は食物アレルギーの発症において重要な役割を担っていることが示唆された。以上のように、卵アレルギーに関わるOVA抗原決定基の一部とHLA拘束分子が、本研究により明らかとなった。

为了阐明T细胞在食物过敏的发展中的作用，我们建立了特异性的T细胞系（OVA）（OVA），这是卵过敏的主要过敏原，并分析了这些T细胞系，HLA限制性分子和OVA刺激的细胞因子产生能力的OVA表位。这项研究提供了以下结果：1）从五种卵子分数为2或更高的蛋白的卵高过敏中，总共建立了29个OVA特异性T细胞系。 2）在OVA识别这些T细胞系中寻找HLA限制的分子表明HLA-DR分子是主要的约束分子。 3）对这次建立的OVA特异性T细胞系的E002应变进行了进一步的分析。通过抗HLA抗体对OVA的抗HLA抗体抑制，E002菌株被证明是HLA-DR的限制。因此，使用已用患者的HLA-DR抗原作为抗原呈递细胞转染的小鼠成纤维细胞进行爆胚反应，并确定在E002菌株中参与OVA识别的HLA分子为HLA-DR10。 4）制作了四个OVA部分合成肽，以阐明E002识别的OVA抗原决定因素。对OVA和OVA的胚胎反应部分合成肽的结果表明，EVA323-339肽中存在菌株E002识别的OVA抗原决定因素。 5）当通过OVA刺激测量培养物上清液中E002菌株产生的细胞因子时，它表明未产生IL-2，IL-4或IFN-γ，但产生了大量IL-5。 IL-5激活嗜酸性粒细胞，表明识别OVA323-339的T细胞在食物过敏的发展中起着重要作用。如上所述，这项研究揭示了与卵过敏和HLA限制分子有关的一些OVA抗原决定因素。