食物アレルギー患者における食物アレルゲン特異的細胞の抗原認識機構

食物过敏患者食物过敏原特异性细胞的抗原识别机制

基本信息

批准号：
06265203
负责人：
河野陽一
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

卵アレルギー患者7名の末梢血単核球から、31株のOVA特異的T細胞株を樹立した。このうち、28株のT細胞株がOVA刺激によりインターロイキン4(IL-4)を産生し、また検索した24株中17株がIL-5を産生したのに対し、ガンマインターフェロン(IFN-γ)を産生する細胞株は認められなかった。T細胞株が認識するエピトープを解析するために、OVAの385のアミノ酸残基のすべてをカバーし、隣り合うペプチドとアミノ酸残基が11個重なりあうような13merの合成ペプチドを187個作成した。これら187個の合成ペプチドを11個ずつプールして17のグループに分け、T細胞株の一部について、この17のグループペプチドに対する芽球化反応を検討した。さらに、その一部について、個々のペプチドに対する応答性を解析した。その結果、4つのOVA T細胞エピトープ抗原決定基が明らかとなった。T細胞株は、OVAを認識するT細胞のうち、minorなポピュレーションを株化した可能性があることから、末梢血単核球のOVAおよびOVAペプチドに対する芽球化反応を調べた。しかし、OVA刺激に対する芽球化反応がきわめて低値であったことから、末梢血中のOVAに応答する細胞のポピューションはきわめて少数である可能性が示唆された。そこで、in vitroで末梢血単核球を1回OVAで刺激し、つづいてIL-2を加えることによりOVA特異的T細胞を増殖させた後に、OVAグループペプチドに対する芽球化反応を解析したところ、OVAで刺激した末梢血単核球は、数個の特定のグループペプチドに対して応答を示した。同一の患者から樹立されたT細胞株が認識したペプチドが、これらのグループペプチドに含まれていたことから、我々が樹立したOVA特異的T細胞は、主要エピトープを認識するT細胞株であり、これらOVA特異的T細胞株が認識するOVAエピトープが、IL-4やIL-5などのアレルギー反応に重要なサイトカイン産生に関連したエピトープであることが示唆された。

从7例卵过敏患者的外周血单核细胞中建立了31个OVA特异性T细胞系。其中，通过刺激OVA产生白介素4（IL-4）的28个T细胞系，产生IL-5的24个搜索菌株中的17个，而没有发现细胞系会产生伽马干扰素（IFN-γ）。为了分析T细胞系识别的表位，创建了187 13mer合成肽，覆盖OVA中的所有385个氨基酸残基，11个重叠的相邻肽和氨基酸残基。将这187种合成肽合并11次，分为17组，对于某些T细胞系，检查了对这17个组肽的爆炸反应。此外，对其中的一些人对单个肽的反应性进行了分析。结果显示四个OVA T细胞表位抗原决定因素。由于T细胞系可能具有少量的OVA识别T细胞，因此我们研究了外周血单核细胞对OVA和OVA肽的爆胚反应。但是，对OVA刺激的极低爆破反应表明，对OVA反应的外周血中细胞的种群可能很小。因此，在用OVA刺激外周血单核细胞，然后添加IL-2以生长OVA特异性T细胞后，我们分析了对OVA组肽的胚源反应。用OVA刺激的外周血单核细胞显示出对几种特定组肽的反应。在这些组肽中发现了从同一患者中确定的T细胞系识别的肽的存在，这表明我们确定的OVA特异性T细胞是识别主要表位的T细胞系，并且由这些OVA特异性T细胞系识别的OVA表位与细胞因子的生产相关，例如对胞质反应的生产，例如质量变异和ORGIR-rergig-regrig-il-il-iL iL iL iL iL iL iL iL iL iL。