顆粒球コロニ-刺激因子の誘導的発現機構の解析

粒细胞集落刺激因子诱导表达机制分析

• 批准号: 02258223
• 负责人: 長田 重一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02258223/
• 关键词: 造血因子; 顆粒球コロニ-刺激因子; 転写制御; 転写因子; マクロファ-ジ; CSF産生腫瘍

顆粒球コロニ-刺激因子(GーCSF)は、骨髄において好中球の増殖と分化を促進する糖タンパク質である。通常、GーCSFは骨髄間質細胞から産生されるが、感染過程においてエンドトキシンなどで刺激されたマクロファ-ジなどからGーCSFが大量に放出される。そして、このGーCSFが感染過程における好中球の増加を担っていると考えられる。また、ある種のヒトがん細胞が異所的、構成的にGーCSFを大量に分泌することも知られている。私達は、これまでにヒト及びマウスGーCSF cDNAを単離し、その一次構造を明らかにするとともに、GーCSFの染色体遺伝子構造を解明した。そこで、本研究では単離したGーCSF染色体遺伝子を用いて、マクロファ-ジでのエンドトキシンによる誘導的発現機構、ヒトがん細胞での構成的発現機構の解析を試みた。ヒト、マウスGーCSF染色体遺伝子の構造を比較すると、転写開始部位より上流300bpのDNA配列は顕著な相同性を示す。そして、レポ-タ-遺伝子CATの発現を指標とした解析より、この部位がGーCSF遺伝子のマクロファ-ジでの誘導的発現、ヒトがん細胞での構成的発現を担っていることを示した。次いで、このプロモ-タ-領域に種々の変異(点変異、欠失変異)を導入することにより、GーCSF遺伝子のプロモ-タ-上には少なくとも三個のcisーelementsが存在し、GーCSF遺伝子の発現を制御していることを示した。さらに、これらのcisーelementの配列を含むDNAをプロ-ブとしたゲル・シフトassayなどにより、マクロファ-ジの細胞株、ヒトGーCSF産生腫瘍などの核抽出液には、これらcisーelementsに特異的に結合する転写因子が存在することを明らかにした。

Granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) promotes proliferation and differentiation of fibroblasts. Usually, G CSF is produced by bone stromal cells, and G CSF is released in large quantities during infection. The infection process of G-CSF is very complicated. A large amount of CSF is secreted from the cells. The structure of the chromosome of G CSF was clarified. In this study, we tried to analyze the mechanism of gene expression induced by G CSF chromosome gene, and the mechanism of gene expression formed by G CSF chromosome gene. Comparison of the structure of the G-CSF chromosome and the DNA alignment of the upstream 300bp from the start of the chromosome The expression of CAT was analyzed and analyzed. The expression of CAT was analyzed and analyzed. The expression of CAT was analyzed and analyzed. In the second place, there are three cis-elements in the G-CSF gene, which are introduced into the G-CSF gene and controlled by the G-CSF gene. In addition, the sequence of cis elements contains DNA, DNA

项目成果

M.Nishizawa: "Multiple elements in the promoter of granulocyte colonyーstimulating factor gene regulate its constitutive expression in human carcinoma cells." J.Biol.Chem.265. 5897-5902 (1990)

M.Nishizawa：“粒细胞集落刺激因子基因启动子中的多个元件调节其在人类癌细胞中的组成型表达。”J.Biol.Chem.265（1990）。

M.Nishizawa: "Regulatory elements responsible for inducible expression of granulocyte colonyーstimulating factor gene in macrophages." Mol.Cell.Biol.10. 2002-2011 (1990)

M.Nishizawa：“负责巨噬细胞中粒细胞集落刺激因子基因诱导表达的调节元件。”Mol.Cell.Biol.10（1990）。

R.Fukunaga: "Purification and characterization of the receptor for murine granulocyte colonyーstimulating factor." J.Biol.Chem.265. 14008-14015 (1990)

R.Fukunaga：“鼠粒细胞集落刺激因子受体的纯化和表征。”J.Biol.Chem.265（1990）。

S.Mizushima: "pEFーBOS:a powerful mammalian expression vector." Nucleic Acids Res.18. 5322 (1990)

S.Mizushima：“pEF-BOS：一种强大的哺乳动物表达载体。”18 号核酸研究 (1990)。

R.Fukunaga: "Three different mRNAs encoding guman granulocyte colonyーstimulating factor receptor." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 8702-8706 (1990)

R.Fukunaga：“编码古曼粒细胞集落刺激因子受体的三种不同 mRNA。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87. 8702-8706 (1990)