神経系培養細胞の分化、機能発現の制御に関わるガングリオシドの役割

神经节苷脂在调节培养神经系统细胞分化和功能表达中的作用

• 批准号: 03255215
• 负责人: 玉井 洋一
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03255215/
• 关键词: ガングリオシド; PC12細胞; 分化; 神経機能; シアル酸転移酵素; シアル酸結合部位; フコ-ス転移酸素

PC12細胞はnerve growth factor(NGF)に応答してneuriteを形成し、ガングリオシド構成も変化する。我々は今までに特定のガングリオシド構成の変化は分化の方向に始動したprimed細胞の方が高く、またアセチルコリンエステラ-ゼ活性の変化と相関していることを見いだしている。本研究ではPC12細胞のNGFによる分化過程のガングリオシドの動態を検討するために、ガングリオシド合成シアル酸転酵素活性の変化を経時的に調べた。PC12をNGFで48時間処理して突起の出た細胞を分化細胞(5μm以上のneurite保持細胞、17%)とし、シアル酸転移酵素の反応産物は、TLCーラジオ-トグラフィ-で標準物質の移動度と比較して確認した。GD3合成酵素については特異的モノクロ-ナル抗体によるTLCー免疫染色で確認した。(1)分化PC12細胞のGD3合成酵素(CMPシアル酸:GM3ーα2→8シアル酸転移酵素)活性は未分化細胞の約2倍であった。primed細胞であるMR31細胞にNGFを48時間処理した場合(5μm以上のneurrite保持細胞、64.7%)では約3倍となった。(2)Lactosylceramideを基質とするGM3合成酵素(α2→3)、GM1を基質とするGDla合成酵素(α2→3)、GDlaを基質とするGTla合成酵素(α2→8)、GTlbを基質とするGQlb合成酵素(α2→8)の各シアル酸転移酸素活性について調べた。GM3合成酸素およびGDla合成酵素活性は分化により2.5ー3倍となったが、GTlaとGQlb合成酸素活性は分化で変化しなかった。PC12細胞の分化に際し、ある特定のガングリオシド合成酵素が選択的に活性化されることが示唆された。(3)PC12細胞にはフコ-ス含有ガングリオシドが含まれるので、分化に伴うガングリオシド合成のフコ-ス転移酸素活性の変化と、分化及び増殖に関係のある癌遺伝子の発現について検討を行なっている。

PC12 cells respond to nerve growth factor(NGF) by forming neurons, and by transforming cells. I am now in the middle of a process of differentiation. I am in the middle of it. The present study investigated the regulation of NGF activity in PC12 cells during the dynamic regulation of NGF synthesis. PC12 was treated with NGF for 48 hours, and the cell differentiation was confirmed by comparing the mobility of standard substances with that of the reaction products of acid transfer enzymes (17%). GD3 synthase is identified by TLC immunostaining for specific antibodies. (1)The activity of GD3 synthase in differentiated PC12 cells was about twice that of undifferentiated cells. MR31 cells were treated with NGF for 48 hours (64.7% of neurons above 5μm). (2) GM3 synthase (α2→3), GM1 synthase (α 2 → 3), GTla synthase (α2→8), GTlb synthase (α2→8), and GQlb synthase (α2→8) are all regulated by Lactosylceramide substrate. The activities of GM3 acid-synthesizing and GDla synthesizing enzymes are 2.5 - 3 times higher than those of GTla and GQlb acid-synthesizing enzymes, and the activities of GTla and GQlb acid-synthesizing enzymes are 2.5 - 3 times higher than those of GTla and GQlb. During differentiation of PC12 cells, specific enzymes were activated to activate the enzyme. (3) PC12 cells contain a variety of genes, such as protein, protein

项目成果

H.Kojima.et al.: "Isolation of a subclonal cell line of PC12 transfected with a dexamethasoneーregulated ras oncogene:morphological differentiation,biochemical properties and tumorigenicity."

H.Kojima.et al.：“用地塞米松调节的 ras 癌基因转染的 PC12 亚克隆细胞系的分离：形态分化、生化特性和致瘤性。”

S.Matsutani,et al.: "Morphometric analysis of stimulusーinduced in the distribution of secretory granules in a subclone of PC12 cells:a rapid freezeーsubstitution study." Biomed.Res.12. 347-350 (1991)

S. Matsutani 等人：“PC12 细胞亚克隆中刺激诱导的分泌颗粒分布的形态学分析：快速冷冻替代研究”(Biomed.Res.12)。