キラ-T細胞による免疫学的ヒト自家癌認識破壊機構

Kira-T细胞的免疫学人类自体癌症识别和破坏机制

• 批准号: 03258237
• 负责人: 菊地 浩吉
• 金额: $ 5.76万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03258237/
• 关键词: CTL; ヒト自家癌; T細胞レセプタ-; RーPCR; 抗原ペプチド; brefeldein A; MHC class I; acid elution

(a)自家癌特異的CTLクロ-ンと標的癌細胞のペアの確立:昨年度はHSTー2、HOT、TOCー2などのペア確立に成功した。今年度はSCC、NICなど8つのペアの確立を行った。即ち、癌性胸腹水からは、10ー20%の症例から自家癌とそのCTLのペアを確立することに成功した。(B)HSTー2(胃印環細胞癌)破壊機構:RーPCRを用いてCTLクロ-ンTcHSTー2のTCRVα、Vβのusageを解析したところ、Vα7かVα12、またVβ20と判明した。次にTcHSTー2によって認識される抗原(T cell epitope)が内在性由来か否かを検討した。ERでMHC classI分子と抗原ペプチドの会合を阻止するbrefeldein A(BFA)でHSTー2を処理したところ、TcHSTー2の細胞障害性が抑制された。一方、クロロキン等では全く効果はなかった。また、BFAで処理されたHSTー2のclass I分子の細胞表面での発現に変化はなかった。即ち、自家癌抗原ペプチドは内在性蛋白由来であり、BFAは細胞表面上のclass Iに会合している抗原ペプチドをempty outする効果をもと理解された。現在、trifluoroacetic acidを用いた抗原抽出とRーHPLCを組あわせ、抗原ペプチドのアミノ酸配列固定を行っている。(c)HOT(卵巣癌)破壊機構:このCTL(TcHOT)はγδ型T細胞でVδ1(+)である。TcHOTはHOTおよびHeLaに障害性を示したが、他の多くのallogeneic linesには効果を示さなかった。MHC拘束性はない。興味あることにBFA処理で細胞障害性が抑制された。現在heat shock proteinを含めたligandの固定と、それらのpresenting moleculeとしての役割、あるいは抗原ペプチドの関与の有無を解析している。(d)CTLのRーPCRによるTCRV region usageの解析:HSTー2および別な胃印環細胞癌であるSSTWでVα7のcommon usageがみられた。そこで、この腫瘍型の手術材料からTlLを分離しRーPCRを行ったところ、いくつかの症例でVα7 usageがみられた。このことはtissue originが同一の場合、CtLのTcell epitopeである抗原ペプチドはある一定の分子であることを推測させた。

(a)Establishment of cancer cell selection for cancer specific CTL targets: HST-2, HOT, TOC-2 were successfully established last year. This year, SCC, NIC, 8, and the establishment of the line. That is, 10 - 20% of cases of malignant pleural effusion were successfully established. (B)HST-2(gastric signet ring cell carcinoma) breaking mechanism:R-PCR use of CTL-TcHST-2 and TCR V α, Vβ usage analysis of V α, Vα7, Vα12, Vβ20 identified. TcHST-2 is the first to recognize the antigen (T cell epitope). ER MHC class I molecules and antigen binding inhibitors Brefeldein A(BFA) and TcHST 2 are inhibited by treatment. One side, one side, one side. The expression of HST-2 class I molecules on the cell surface was detected by BFA. That is to say, the origin of the intrinsic protein of the BFA and the empty out of the antigen on the cell surface Now, trifluoroacetic acid is used for antigen extraction and HPLC. (c)HOT(ovarian cancer) breaking mechanism: CTL(TcHOT) γ δ T cells Vδ1(+). TcHOT is the most harmful element of HeLa, and its allogeneic lines are the most effective. MHC binding behavior is not appropriate. BFA treatment inhibited cell toxicity. Now heat shock protein contains ligand (d)CTL PCR analysis of TCRV region usage:HST 2 The surgical material of the tumor type is separated from TlL by PCR. The tissue origin is the same as the cell epitope.

项目成果

wada,Y.,Ikeda,H.,Takahashi,S.,Hirata,K.Sato,N.,and Kikuchi,K.: "Methodological improvement for the in vitro proliferation and maintenance of the cytotoxic specificity or cryopreserved cytotoxic T cell clone reacting against Human autologous tumor cells."

wada,Y.、Ikeda,H.、Takahashi,S.、Hirata,K.Sato,N. 和 Kikuchi,K.：“细胞毒性特异性或冷冻保存的细胞毒性 T 细胞克隆的体外增殖和维持的方法学改进

Sato,N.,Wada,Y.,Ikeda,H.Takahashi,S.,Takashima,T.Tsuboi,N.,Kishi,A.,Hirata,K.,and Kikuchi,K.: "Role of tumorーassociated antigens in induction of the specific killing by cytotoxic T lymphocytes in human autologous cancers." Jap.J.Cancer Res.,.

Sato, N.、Wada, Y.、Ikeda, H. Takahashi, S.、Takashima, T. Tsuboi, N.、Kishi, A.、Hirata, K. 和 Kikuchi, K.：“肿瘤相关的作用抗原诱导人类自体癌症中细胞毒性 T 淋巴细胞的特异性杀伤。”Jap.J.Cancer Res.,。

Cho,J.,Sato,N.,Yagihashi,A.,Konno,A.,Wada,Y.,Takahashi,N.,Takashima,T.and Kikuchi,K.,: "Natural killer target molecules associated with the transformation of the oncogeneーtransformed fibroblast." Cancer Res.,. 51. 4250-4256 (1991)

Cho, J.、Sato, N.、Yagihashi, A.、Konno, A.、Wada, Y.、Takahashi, N.、Takashima, T. 和 Kikuchi, K.，：“与转化相关的自然杀伤目标分子癌基因转化的成纤维细胞。” Cancer Res.,. 51. 4250-4256 (1991)

Kikuchi,K.,Okubo,M.,Sato,T.,and Sato,N.,: "Cytotoxic T cell clones against human autologous cancers:Analysis of target antigen and the mechanism of specific target cell destruction." Japan Scientific Societies Press,Tokyo, 11 (1989)

Kikuchi,K.、Okubo,M.、Sato,T. 和 Sato,N.，：“针对人类自体癌症的细胞毒性 T 细胞克隆：靶抗原分析和特定靶细胞破坏的机制。”

Okubo,M.,Sato,N.,Wada,Y.,Takahashi,S.,Torimoto,K.,Takahashi,N.,Sato,T.,Okazaki,M.,Asaishi,K.,and Kikuchi,K.,: "Idenyification by monoclonal antibody of the tumor antigen of a humor autologous breast cancer cell that is involved in the cytotoxicity by a cy

大久保，M.，佐藤，N.，和田，Y.，高桥，S.，鸟本，K.，高桥，N.，佐藤，T.，冈崎，M.，浅石，K.和菊池，K.