ペプチド・MHCクラスI分子に対する免疫寛容の成立機序の解析

肽及MHC I类分子免疫耐受机制分析

• 批准号: 06265208
• 负责人: 滝口 雅文
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06265208/
• 关键词: HLAクラスI抗原; HLAクラスI抗原結合ペプチド; ペプチドモチーフ; T細胞; 免疫寛容

自己の抗原に対する寛容の成立は、主に胸腺において自己のMHC-ペプチド複合体をT細胞が認識して、ネガティブセレクションがおこることによると考えられている。この免疫寛容の成立に最も大きな影響を与えるHLAクラスI分子に結合するペプチドの解析は、まだきわめて限られている。そこで多数のHLA class I allele分子に結合する自己抗原ペプチドを解析した。精製したクラスI分子より結合ペプチドを分離、HPLCにて分画した後、ピーク分画およびそれ以外の分画をプールしたものについて、エドマン法によりアミノ酸解析した。この結果、HLA-A1,-A11,-A31,-A33,-B35,-B38,-B39,-B51,-B52,-B78,-B58,-B60,-B61,-B62に結合している自己抗原ペプチドのモチーフを明らかにすることができた。さらにHLAクラスI分子と多数のペプチドの結合を測定できる系を開発し、これを用いてHLA-B35分子とペプチドの結合について解析した。118個の9-merペプチドとHLA-B^*3501分子との結合では、9番目がTyrのときは最も結合力が強く、Phe,Leu,Ile,Metの順であった。これはプールした自己抗原ペプチドをエドマン法により解析した結果とほぼ一致していた。C末端がTyrである100個の8-12 merの合成ペプチドとHLA-B^*3501分子との結合を解析したところ、10-merから12-merの長いペプチドでも効率的にHLA-B^*3501分子と結合できることが明らかになった。さらにペプチドのアンカー(2番目と9番目)以外の部位がHLA-B^*3501との結合に影響を与えないかを118個の9-merを用いて調べたところ、1,3,4,5,7番目の部位でもHLA-B^*3501分子への結合に影響を与えることが明らかになった。このことより、ペプチドとHLAクラスI分子の結合にはペプチドのアンカー部位が最も重要だが、アンカー以上の部位も強く影響を与えることが明らかになった。

His の antigen に す seaborne る understanding let の は, Lord に thymus に お い て himself の MHC - ペ プ チ ド complex を t-cell が know し て, ネ ガ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン が お こ る こ と に よ る と exam え ら れ て い る. こ の immune established understanding let の に も most big き な influence を and え る HLA ク ラ ス に I molecules combine す る ペ プ チ ド の analytical は, ま だ き わ め て limit ら れ て い る. Youdaoplaceholder0 で で most <s:1> HLA class I allele molecules に bind to する their own antigens ペプチドを resolve た. Refined し た ク ラ ス I molecules よ り combining ペ プ チ ド を separation and HPLC に て points draw し た, ピ ー ク points draw お よ び そ れ の points outside painting を プ ー ル し た も の に つ い て, エ ド マ ン method に よ り ア ミ ノ acid resolution し た. こ の results, HLA - A1, A11, - A31, - A33 - B35 - B38 - B39 - B51 - b-52, - B78, - B58 - B60 - B61 - B62 に combining し て い る their antigen ペ プ チ ド の モ チ ー フ を Ming ら か に す る こ と が で き た. Molecular と さ ら に HLA ク ラ ス I most の ペ プ チ ド の で combination with the determination of the を き る started を 発 し, こ れ を with い て HLA B35 molecular と ペ プ チ ド の combining に つ い て parsing し た. 118 の 9 - killing ペ プ チ ド と HLA - B ^ * 3501 molecular と の combining で は, 9 times eye が Tyr の と き は も most strong binding force が く, Phe, Leu, Ile, Met の shun で あ っ た. こ れ は プ ー ル し た their antigen ペ プ チ ド を エ ド マ ン method に よ り parsing し た results と ほ ぼ consistent し て い た. 100 C terminal が Tyr で あ る の 8-12 killing の synthetic ペ プ チ ド と HLA - B ^ * 3501 molecular と の combining analytical し を た と こ ろ, 10 - killing か ら 12 - killing の long い ペ プ チ ド で も sharper rate に HLA - B ^ * 3501 molecular と combining で き る こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に ペ プ チ ド の ア ン カ ー (2 times yard と 9 times) outside の parts が HLA - B ^ * 3501 と の に influence を with え な い か を 118 の 9 - killing を with い て adjustable べ た と こ ろ, 1,3,4,5,7's eye の parts で も HLA - B ^ * 3501 molecular へ の に influence を with え る こ と が Ming ら か に Youdaoplaceholder0. こ の こ と よ り, ペ プ チ ド と HLA ク ラ ス I molecular の に は ペ プ チ ド の ア ン カ が ー parts is important だ も が, ア ン カ ー above の parts も strong く influence を and え る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

Kristen Falk: "Peptide motifs of HLA-A1,-A11,-A31 and -A33 molecules." Immunogenetics. 40. 238-241 (1994)

Kristen Falk：“HLA-A1、-A11、-A31 和 -A33 分子的肽基序。”

John Sidney: "Several HL A alleles share overlapping peptide specificities." Journal of Immunology. 154. 247-259 (1995)

John Sidney：“几个 HL A 等位基因具有重叠的肽特异性。”

Yoshifumi Beck: "Polymorphism of human minor histocompatibility antigen:T cellrecognition of human minor histocompatibility peptides prescnted by HLA-B35 subtype molecules." Journal of Experimental Medicine. (印刷中).

Yoshifumi Beck：“人类次要组织相容性抗原的多态性：HLA-B35 亚型分子呈现的人次要组织相容性肽的 T 细胞识别”（正在出版）。

Yoshifumi Beck: "Expression of human minor histocompatibility antigen on cultured kidney cells." European Journal of Immunology. 23. 467-472 (1993)

Yoshifumi Beck：“人类次要组织相容性抗原在培养的肾细胞上的表达。”

Yuji Takamiya: "HLA-B^*3501-peptide interactions:Role of anchor residues of peptides in their binding to HLA-B^*3501 molecules." International Immunology. 6. 255-261 (1994)

Yuji Takamiya：“HLA-B^*3501-肽相互作用：肽的锚定残基在与 HLA-B^*3501 分子结合中的作用。”