HLAクラスI・ペプチド複合体が形成するT細胞エピトープの多様性の解析

HLA I类/肽复合物形成的T细胞表位多样性分析

• 批准号: 08282207
• 负责人: 滝口 雅文
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08282207/
• 关键词: HLAクラスI; T細胞エピトープ; ペプチド; 多様性; 抗原提示; 細胞傷害性T細胞

研究目的:我々はT細胞エピトープの同定に、いままでの方法とは異なった方法、すなわちMHCクラスI分子に結合する自己抗原ペプチドのモチーフよりCTLエピトープを同定する方法(リバース・イムノジェネティックス法)を以前に確立した。この方法を用いてHLAクラスI分子が提示する様々なウイルス蛋白由来のCTLエピトープを多数同定し、さらにこれらのエピトープに対するCTLクローンを作製してCTLのエピトープ認識を詳細に検討する。研究成果:HLA-B^*3501,-B^*5101および-A^*2402結合自己抗原ペプチドのモチーフに一致したprimary anchorをもったHIV-1およびHCV由来のペプチドを多数合成し、RMA-Sトランスフェクタント細胞を用いたHLAクラスI stabilization assayによってそれぞれのHLAクラスIに結合するペプチドを同定した。結合したペプチドのシークエンスを解析し、primary anchor以外でこれらのHLAクラスI分子への結合に重要な役割を果たしている部位(secondary ancrhor)を決定した。HLA-B35およびHLA-A24をもったHIV-1感染者のPBLを、HLA-B^*3501,-A^*2402結合HIV-1ペプチドで刺激し、特異的CTLを誘導することによりHIV-1 CTLエピトープを同定した。HLA-B^*3501分子によって提示される9種類、HLA-A^*2402分子によって提示される11種類のHIV-1 CTLエピトープが同定できた。これらのエピトープに対するCTLクローンをすべて作製し、このクローンを用いてこれらの20種類のエピトープを確認した。

Research purposes: I 々 は t-cell エ ピ ト ー プ の with に, い ま ま で の way と は different な っ た method, す な わ ち MHC ク ラ ス に I molecules combine す る their antigen ペ プ チ ド の モ チ ー フ よ り CTL エ ピ ト ー プ を with fixed す る method (リ バ ー ス · イ ム ノ ジ ェ ネ テ ィ ッ ク ス method) を に before establishing し た. こ の way を with い て HLA ク ラ ス molecular が I suggest す る others 々 な ウ イ ル ス protein origin の CTL エ ピ ト ー プ を most with し, さ ら に こ れ ら の エ ピ ト ー プ に す seaborne る CTL ク ロ ー ン を cropping し て CTL の エ ピ ト ー プ know detailed に を beg す 検 る. Research results: HLA - B ^ * 3501, 5101 - B ^ * お よ び - A ^ * 2402 with his antigen ペ プ チ ド の モ チ ー フ に consistent し た primary Anchor を も っ た HIV - 1 お よ び HCV origin の ペ プ チ ド を most synthetic し, RMA -s ト ラ ン ス フ ェ ク タ ン ト cells を using い た HLA ク ラ ス I stabilization assay に よ っ て そ れ ぞ れ の HLA ク ラ ス I に combining す る ペ プ チ ド を with fixed し た. Combining し た ペ プ チ ド の シ ー ク エ ン ス を analytical し, primary outside anchor で こ れ ら の HLA ク ラ ス I molecules へ の に な "を cut fruit very important た し て い る parts (secondary ancrhor) を decided し た. HLA - B35 お よ び HLA - A24 を も っ た people infected with HIV - 1 の PBL を, HLA - B ^ * 3501, 2402 - A ^ * combined with HIV - 1 ペ プ チ ド で stimulation し, specific CTL を induced す る こ と に よ り HIV - 1 CTL エ ピ ト ー プ を with fixed し た. HLA - B ^ * 3501 molecular に よ っ て prompt さ れ る 9 species, HLA - A ^ * 2402 molecular に よ っ て prompt さ れ る 11 kinds の HIV - 1 CTL エ ピ ト ー プ が with fixed で き た. こ れ ら の エ ピ ト ー プ に す seaborne る CTL ク ロ ー ン を す べ て as し, こ の ク ロ ー ン を with い て こ れ ら の 20 kinds の エ ピ ト ー プ を confirm し た.

项目成果

Robert L.Ferris: "ClassI-resrnicted prosoutation of an HIV-1 gp41 epitspe containing an N-linkod glycosylation site" Journal of Immunology. 156. 834-840 (1996)

Robert L.Ferris：“包含 N-linkod 糖基化位点的 HIV-1 gp41 表位点的 I 类限制的 prooutation”《免疫学杂志》。

Christian Schonbach: "Rolind peptide-HLA-B^*3501 binding motif revesle ocifteremcs in 9-man to il-per perticil motif" Immunogenetics. 45. 121-129 (1996)

Christian Schonbach：“Rolind 肽-HLA-B^*3501 结合基序以 9 人到 il-perticil 基序反转 ocifteremcs”免疫遗传学。

Tao Dong: "An HLA-B35-restricted epitope msolified at an anchor resiolue rosults in an antagonist pepticle" Eun.J.Immunol. 26. 335-339 (1996)

陶冬：“HLA-B35 限制性表位在锚固位点处固定，导致拮抗肽”Eun.J.Immunol。

Christian Schonbach: "Identiflcation of HTLU-1 specific CTL clirected ageinst syntletic and naturally psocessed pepticlesin HLA-B3501 trausgenic micl" Virology. 226. 102-112 (1996)

Christian Schonbach：“鉴定 HTLU-1 特异性 CTL 合成的和自然产生的胃蛋白酶 HLA-B3501 创伤性微球”病毒学。

Yuji Takamiya: "Role of HLA-B^*5101 binding nonamer peplidcs in formation of the HLA-Bw4 peblic epitope" Intarnational Immunology. 8. 1027-1034 (1996)

Yuji Takamiya：“HLA-B^*5101 结合九聚体肽在 HLA-Bw4 表位形成中的作用”国际免疫学。