インターフェロン遺伝子転写調節因子と制御配列DNAの分子認識に関する構造学的研究

干扰素基因转录调节因子及控制序列DNA的分子识别结构研究

基本信息

  • 批准号:
    06266209
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1994
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1994 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究ではマウス・インターフェロン遺伝子転写調節因子-2(IRF-2)DNA結合ドメイン,マウスOct-3POU-h omeoドメインなどのDNA結合性の転写因子の溶液中での立体構造を核磁気共鳴法で決定し、DNAと複合体の解析も進めることによって、DNA塩基配列の認識機構を立体構造に基づいて明らかにすることを目的とした。まずマウス・インターフェロン遺伝子転写調節因子-2(IRF-2)DNA結合ドメインについては、主鎖の殆ど全てと側鎖のかなりの部分の水素核、窒素核、炭素核のNMRシグナルの帰属を終了し、水素原子間の距離情報や、主鎖の2面角の角度情報などを収集して2次構造を決定した。その結果、このドメインは3本のヘリックス構造と4本のβストランドからなる反平行βシート構造を持つことが判った。興味深いことにアミノ酸配列のレベルでは殆ど相同性を示さなかったにも関わらず、IRF-2DNA結合ドメインは幾つかあるループ様構造を除けば大腸菌cAMP受容対蛋白質(CRP)、HNF-3、klaHSPなどと似通った2次構造パターンを示す。従って、IRF-2DNA結合ドメインはwinged helix DNA結合モチーフを持つ可能性があることが判明した。マウスOct-3 POU-homeoドメインについては、主鎖・側鎖とも殆ど全ての水素核、窒素核、炭素核のNMRシグナルの帰属を終了し、水素原子間の距離情報や、主鎖の2面角の角度情報などを収集して立体構造を決定した。精度については主鎖の原子核についてR.M.S.D.で0.44オングストロームまで精密に決定することができた。その結果、疎水性残基のクラスターによってコンパクトに折り畳まれた3本のαヘリックス構造を持つことが判った。得られた構造はショウジョウバエEngr ailedやAnnt enapedi aなどの典型的なhomeoドメインと良く似ている。但し、DNAと直接相互作用する3番目のヘリックスのC末端部分は、POU-homeoではdi sor der した構造になっていた。
In this study, the stereostructure of DNA binding regulatory factor-2 (IRF-2) in solution was determined by nuclear magnetic resonance (NMR), and the molecular structure of DNA binding regulatory factor-2 (IRF-2) was determined by NMR. DNA binding regulatory factor-2 (IRF-2)DNA binding regulatory factor 2 (IRF-2)DNA binding regulatory factor 2 (IRF-2 (IRF-2) DNA binding factor 2 (IRF As a result, the structure of 3 elements and the structure of 4 elements are antiparallel. In addition to the expression of E. coli cAMP receptor protein (CRP), HNF-3, and klaHSP, the expression of IRF-2 DNA binding protein is similar to that of E. coli cAMP receptor protein. IRF-2 DNA binding is not a winged-helix DNA binding. The distance information between water atoms, the angle information of the two faces of the main lock, the concentration and the three-dimensional structure are determined. Accuracy: R.M.S.D.= 0.44 ° C As a result, the structure of the amino acid residues was determined. It's a good idea to build a model for your home. However, direct interaction between DNA and the C-terminal part of the protein is not possible.

项目成果

期刊论文数量(8)
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