心筋細胞のアポトーシス誘導機構と心筋症病態形成に果たす役割に関する研究

心肌细胞凋亡诱导机制及其在心肌病发病中的作用研究

• 批准号: 06274103
• 负责人: 松森 昭
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06274103/
• 关键词: 心筋細胞; 腫瘍壊死因子; アポトーシス; サイトカイン; 心筋症; インターロイキン; ウイルス; DNA断片化

アポトーシスは、核の凝縮断片化、DNAの断片化等の特徴を持つ細胞死であり、発生・分化において重要な役割を果たしている。心臓でのアポトーシスに関する研究は少ないが、HIV感染によるAIDSと同様にウイルス感染による心筋炎、及びそれに引き続く拡張型心筋症様病態への進展にアポトーシスが関与している可能性が考えられる。我々は最近、心筋炎、心筋症患者での血中TNF-αが高値を示し、またマウスEMCウイルス性心筋炎モデルにおいて血中TNF-αが上昇し、抗TNF-α抗体の投与により心筋細胞障害が軽減することを報告した。本研究の目的は心筋細胞死とアポトーシスとの関連を明らかにし、心筋細胞死の予防、治療法を開発することである。本年度は、我々の開発しEMCウイルス性心筋炎においてサイトカインの発現とアポトーシスの関連について検討した。4週令DBA/2マウスにencephalomyocarditis(EMC)ウイルスを接種し、1、3、7、14、28、80日後に屠殺、心臓を摘出し、RNAを抽出、cDNAを合成し、PCR法を用いIL-1β、IL-2,IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-αのmRNAおよびEMCウイルスRNAを半定量した。EMCウイルスRNAはウイルス接種1日後より検出され、7日後に最高となったが、80日後でも検出された。IL-1β,TNF-αは3日後から有意に発現が増強し、多くのサイトカインの発現は7日後に最高となり、すべてのサイトカインmRNAは80日後も検出された。ApopTag(In Situ Apoptosis Detection Kit)を用いたDNA断片化の検討では、ウイルス接種5日後より陽性細胞が出現し、7日後最も広汎となり、14日後も持続した。以上の結果、ウイルス感染による心筋細胞死にアポトーシスが関与している可能性が示唆された。

ア ポ ト ー シ ス は, nuclear condensation の fragment, の DNA fragment of の characteristics of 徴 を hold つ cell death で あ り, born 発 differentiation に お い て important な "を cut fruit た し て い る. Heart viscera で の ア ポ ト ー シ ス に masato す る research は less な い が, HIV infection に よ る AIDS と with others に ウ イ ル ス infection に よ る heart muscle inflammation, and び そ れ に lead き 続 く company, zhang others in core muscle disease pathological へ の progress に ア ポ ト ー シ ス が masato and し て い る possibility が exam え ら れ る. I 々 は recently, heart muscle inflammation, heart muscle disease patients で の serum TNF alpha が high numerical を し, ま た マ ウ ス EMC ウ イ ル ス sex heart muscle inflammation モ デ ル に お い て serum TNF alpha が rise し, anti TNF alpha antibody の cast with に よ り handicap of heart muscle cells が 軽 minus す る こ と を report し た. Purpose this study の は heart muscle cells die と ア ポ ト ー シ ス と の masato even を Ming ら か に し, heart muscle cells die の to prevent and therapy を 発 す る こ と で あ る. は, this year I 々 の open 発 し EMC ウ イ ル ス sex heart muscle inflammation に お い て サ イ ト カ イ ン の 発 now と ア ポ ト ー シ ス の masato even に つ い て beg し 検 た. After 4 weeks of DBA/2 ウスに ウスにencephalomyocarditis(EMC)ウ <s:1> ウス を スを スを スを, at 1, 3, 7, 14, 28, and 80 days, に slaughter, を extraction of the heart, を extraction of RNA, を synthesis of cDNA, and PCR method を use <s:1> IL-1β, IL-2,IL-4,IL-10,IF N-γ,TNF-α <s:1> mRNAおよびEMCウ を ス ス スRNAを semi-quantitative た た. EMC ウ イ ル ス RNA は ウ イ ル ス vaccination 1st よ り 検 out さ れ, 7 に highest-ranking と な っ た が, 80 later で も 検 out さ れ た. IL - 1 beta, TNF alpha は 3 later か ら intentionally に 発 が raised strong し, now many く の サ イ ト カ イ ン の 発 は now 7 に highest-ranking と な り, す べ て の サ イ ト カ イ ン mRNA は 80 later も 検 out さ れ た. ApopTag (In Situ Apoptosis Detection Kit) を い た DNA fragment the の beg で 検 は, ウ イ ル ス vaccination 5 よ り positive cells appear が し, 7 In the future the most も hiroo generic と な り, after 14 も hold 続 し た. の above results, ウ イ ル ス infection に よ る heart muscle cells die に ア ポ ト ー シ ス が masato and し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Sato Y et al: "Autoantibodies against vimentinin a murine model of myocarditis." Autoimmunity. 18. 145-148 (1994)

Sato Y 等人：“抗波形蛋白的自身抗体，小鼠心肌炎模型。”

Yamada T et al: "Therapeutic effect of anti-tumor necrosis factor-α antibody on the murine model of viral myocarditis induced by encephalomyocarditis virus." Circulation. 89. 846-851 (1994)

Yamada T 等人：“抗肿瘤坏死因子-α 抗体对脑心肌炎病毒诱导的病毒性心肌炎小鼠模型的治疗作用。”循环。

Matsumori A et al: "Vesnarinone,a new intropic agent,inhibits cytokine production by stimulated human blood from patients with heart failure." Circulation. 89. 955-958 (1994)

Matsumori A 等人：“Vesnarinone 是一种新型肌力药物，通过刺激心力衰竭患者的人体血液来抑制细胞因子的产生。”

Shioi T et al: "Inhibition of cytokine producti-on by a new inotropic agent,vesnarinone,in human lymphocytes,T cell line andmonocytic cell line." Life Sci. 54. PL11-16 (1994)

Shioi T 等人：“新型正性肌力药物 vesnarinone 可抑制人淋巴细胞、T 细胞系和单核细胞系中细胞因子的产生。”

Matsui S et al: "Vesnarinone prolongs survival and reduces lethality in a murine model oflethal endotoxemia." Life Sci. 55. 1735-1741 (1994)

Matsui S 等人：“Vesnarinone 可延长致命性内毒素血症小鼠模型的存活率并降低致死率。”