腫瘍でのADF/チオレドキシンの活性化機構並びに抗癌剤の影響の作用機序の解析

ADF/硫氧还蛋白在肿瘤中的激活机制及抗癌药物的作用机制分析

• 批准号: 06282112
• 负责人: 淀井 淳司
• 金额: $ 5.57万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06282112/
• 关键词: ADF; チオレオキシン; ラジカルスカベンジャー; 抗癌剤耐性

申請者(淀井)らにより分離精製されたATL由来因子(ADF)は大腸菌チオレドキシン(TRX)のヒトホモであり、還元活性、ラジカル消去能、抗TNF作用を持ち、各種ウイルス感染細胞、腫瘍組織で高発現が見られる。本研究は腫瘍組織、ウイルス感染に伴うADFの発現機構および調節の解析を行い、以下のような結果を得た。1)約2.1KbのADFプロモーター上流域を用いてCATアッセイを行い、ビンクリスチン、アドリアシン、エトポシドによる誘導が見られた。mutantを用いた実験より、我々の提唱しているオキシストレス反応領域を介してこれらの抗癌剤により誘導されていると考えられた。(淀井)2)TRX systemはシスプラチン耐性細胞において機能が亢進しており,シスプラチン耐性への関与が示唆された.A2780細胞においてTRXは単独ではシスプラチン耐性をもたらさず,耐性にはTRXと共働する分子が必要であると考えられた。(富田)3)TRXを少量発現するEBV感染B細胞株1G8を用いて、抗TRX抗体による100%に達する増殖抑制、PKC阻害剤(スタウロスポリン、カルホスチン)による抑制がみられ、増殖機構へはPKCを介する経路が示唆された。また、TRXによりCaの細胞内外の動員が見られた。この際、TPAに比して強く遷延するPKCのtranslocationが見られ、DAG活性の2相性ピークも見られた。2相目のDAGはプロパノール抑制を受けるが、プロパノール処理では細胞の増殖は阻害されず、PC-PLDのシグナル伝達は細胞増殖には関与しないと考えられた。(若杉)4)マウス線維肉腫BMT-11c19より樹立したQR-32の免疫原性は好中球、マクロファージ、NK細胞由来の活性酸素により低下したが、これにはQR-32由来PGE2の関与が考えられた。局所免疫はMn-SOD,GSH-Pxなどのラジカルスカベンジャーで保たれるため、局所の免疫にTRXを含むラジカルスカベンジャーの関与が示唆された。(細川)

ATL derived factor (ADF) was isolated and purified by the applicant (Yoshii). High levels of ADF, anti-E. coli TRX, anti-TNF activity, anti-TNF activity, and high levels of ADF in infected cells and tumor tissues were observed. In this study, we analyzed the mechanisms of ADF development and regulation in tumor tissue and its infection, and obtained the following results. 1)About 2.1Kb ADF top layer flow domain, use CAT top layer, application top layer. Mutants are used in anti-cancer research. (2)TRX system is not only resistant to stress, but also resistant to stress. In A2780 cells, TRX system is not only resistant to stress, but also resistant to stress. (Tomita)3) EBV infected B cell line 1G8 with TRX was detected in small amounts. Anti-TRX antibodies were used to inhibit proliferation by up to 100%. PKC inhibitors were used to inhibit proliferation. Also, the mobilization of Ca inside and outside the cell in TRX has been observed. At the same time, TPA activity is strongly delayed, PKC translocation is observed, DAG activity is biphasic. 2. DAG and PLD inhibition of cell proliferation and PC-PLD inhibition of cell proliferation 4) BMT-11c19 is the first to establish the immunogenicity of QR-32, which is related to the decrease of active acid in NK cells, and the relationship between QR-32 and PGE2. Mn-SOD,GSH-Px and TRX are immune to each other. (Hosokawa)