腫瘍でのADF/チオレドキシンの活性化機構並びに抗癌剤の影響と作用機序の解析

ADF/硫氧还蛋白在肿瘤中的激活机制及抗癌药物的作用及机制分析

• 批准号: 08266107
• 负责人: 淀井 淳司
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266107/
• 关键词: ADF; チオレドキシン; レドックス; 抗癌剤耐性; 腫瘍マーカー

HTLV-I感染細胞株培養上清中より分離精製されたATL由来因子(ADF)は大腸菌の還元補酵素チオレドキシン(TRX)のヒト相同体であり、その活性部位にあるシステイン残基を介した酸化還元反応により活性酸素消去作用、細胞増殖促進作用、細胞障害防御作用(抗アポトーシス作用)、転写因子の転写活性調節作用などの多彩な機能を有する因子として報告されている。今回、ADF/TRXをはじめとする細胞内チオールによるレドックス制御が腫瘍細胞の持つ生物学的特性、とくに抗癌剤耐性獲得機構にいかに関与しているかを解析し、以下のような結果が得られた。1)、ADF/TRXの発現増強がシスプラチン、ブレオマイシン、アドリアマイシンなどの抗癌剤に対する耐性獲得機序に関与することが明らかとなった。さらに、ADF/TRXの活性を変化させる薬剤によりこれらの抗癌剤に対する感受性を調節しうること、また、シスプラチンなどの抗癌剤がチオレドキシンリダクターゼ(TRXR)の還元活性を阻害することなどが判明した。以上の結果より、TRX系(ADF/TRXおよびTRXR)は癌治療における新たな分子標的となるうるものと示唆された。2)、肝細胞癌患者の摘出標本を用いた解析により、肝腫瘍組織におけるADF/TRXの発現量が腫瘍マーカーとして、また、シスプラチン感受性のマーカーとして有用である可能性が示唆された。3)、サンドイッチELISA法によるADF/TRXの定量法を開発し、肝細胞癌患者の血清中ADF/TRX値が非担癌肝疾患患者及び健常人よりも有意に高値を示すことを明らかにした。血清中ADF/TRX値が肝細胞癌における腫瘍マーカーとして有用である可能性が示唆された。今後のさらなる検討により、組織、血清中ADF/TRXの定量による臨床診断、ADF/TRXを新たな分子標的とした癌治療など、臨床医学的な応用が期待される。

ATL derived factor (ADF) was isolated and purified from culture supernatant of HTLV-I infected cell line. ADF was used as a mediator for the protein identity of E. coli reductase (TRX), and its active site was also used as a mediator for the active acid elimination, cell proliferation promotion, and cell damage defense.(Anti-virus effect), writing factor and writing activity regulation effect, and colorful function of writing factor are reported. In this paper, ADF/TRX is used to analyze the biological characteristics of tumor cells and the mechanism of anti-cancer resistance acquisition. The following results are obtained. 1)The development of ADF/TRX is related to the acquisition of resistance mechanisms for anti-cancer agents. In addition, ADF/TRX activity is regulated by the sensitivity of the anticancer agent to (TRXR), and the inhibition of the reductive activity of the anticancer agent to (TRXR) is determined. These results indicate that TRX is a new molecular target for cancer therapy (ADF/TRX). 2)The possibility of detecting ADF/TRX in liver tumor tissue is demonstrated by the analysis of tumor susceptibility in patients with hepatocellular carcinoma. 3)ADF/TRX quantitative method was developed in patients with hepatocellular carcinoma. ADF/TRX levels in patients with non-cancerous liver diseases and healthy individuals were significantly higher than those in healthy individuals. Serum ADF/TRX levels are higher than normal levels. In the future, ADF/TRX quantification in tissues and serum will be expected for clinical diagnosis, cancer treatment and clinical medicine.

项目成果

Hirota,K.: "AP-1 transcriptional activity is regulated by a direct association between thioredoxin and Ref-1." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (1997)

Hirota,K.：“AP-1 转录活性由硫氧还蛋白和 Ref-1 之间的直接关联调节。”

Taniguchi,Y.: "A novel promotor sequence is involved in the oxidative stress-induced expression of the adult T cell leuekmia-derived factor(ADF)/human thioredoxin(TRX)gene." Nucleic Acid Res.24. 2746-2752 (1996)

Taniguchi,Y.：“一种新的启动子序列参与氧化应激诱导的成人 T 细胞白血病衍生因子 (ADF)/人硫氧还蛋白 (TRX) 基因的表达。”

Nakamura,K.: "Inhibition of protein kinase C-mediated CD4 down-regulation by oxidative stress in T lymphocytes." J.Immunol.157. 5339-5349 (1996)

Nakamura,K.：“T 淋巴细胞氧化应激抑制蛋白激酶 C 介导的 CD4 下调。”

Matsui,M.: "Early embryonic lethality caused by targeted disruption of the mouse thioredoxin gene." Developmental Biology. 178. 179-185 (1996)

Matsui,M.：“小鼠硫氧还蛋白基因的靶向破坏导致早期胚胎致死。”

Masutani,H.: "Transactivation of an oxidative stress sensing protein,human thioredoxin(TRX)by HTLV-I Tax." Immunol.Lett.(in press). (1997)

Masutani, H.：“通过 HTLV-I Tax 反式激活氧化应激传感蛋白人硫氧还蛋白 (TRX)。”