TatおよびNef蛋白のレドックス制御異常による細胞死と細胞内シグナル失調の研究

Tat 和 Nef 蛋白氧化还原调节异常导致细胞死亡和细胞内信号失衡的研究

• 批准号: 08269212
• 负责人: 淀井 淳司
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08269212/
• 关键词: チオレドキシン; レドックス制御; HIV感染; 酸化ストレス

HIV感染では還元環境の異常が報告されており、細胞内還元環境維持に重要な役割を果たしているグルタチオンやチオレドキシンなどの抗酸化剤によるその防御が重要である。過酸化水素をはじめとする酸化ストレスはNF‐kBなどの転写因子の活性化に関与し、HIVウイルスの増殖を促進する。また、HIVウイルスのgp120蛋白とリンパ球表面のCD4分子との接着もレドックス制御を受けていることが明らかとなった。今年度の成果として1)我々はP MAによるCD4分子の発現低下が、酸化ストレスにより制御され、これまでに知られているセリン燐酸化およびCD4とP561ckの乖離以外の新しい制御メカニズムによることを明らかにした。このことは、炎症などの酸化ストレスがHIVウイルスのTリンパ球への感染を促進することを示唆する。酸化ストレスによるCD4発現抑制のメカニズムをさらに検討する予定である。2)また、JurkatおよびU937にHIVを感染させ、経時的にチオレドキシン,Bcl‐2,HIVp24,アクチン量を検討した。感染初期にアポトーシスによる細胞死の時期に一致してBcl‐2とチオレドキシンの発現低下を認め、Bcl‐2のアンチセンスDNA発現transfectantではHIV感染によりコントロールに比し、より高率にアポトーシスを認めた。現在その発現変動のメカニズムとしてウイルス蛋白の関与の解析を行っている。3)さらに、HIV感染者での血中チオレドキシン値をsandwitch ELISAにて検討したところ、HIV陽性群は陰性群に比べてチオレドキシンは高い傾向が認められた。HIV陽性群の中でも、血中チオレドキシンが高い群では生存期間が短縮しており、予後不良の結果が得られ、予後判定のモニターとして有用であることが考えられた。これはHIV感染が進展した状態での酸化ストレスによるものと考えられ、今後このチオレドキシン高値が何によるものかをさらに解析していくことが重要だと思われる。これらの研究を通じてエイズ病態におけるレドックス異常のメカニズムを解析し、エイズ病態把握の指標を作成することを目指す。

HIV infection で は yuan environmental の abnormal が report also さ れ て お り, also in the cell environment maintain に important な "を cut fruit た し て い る グ ル タ チ オ ン や チ オ レ ド キ シ ン な ど の resistance acidification tonic に よ る そ の defense が important で あ る. Water acidification passes element を は じ め と す る acidification ス ト レ ス は NF ‐ kB な ど の planning write factor の activeness に masato and し, HIV ウ イ ル ス の raised colonization を promote す る. ま た, HIV ウ イ ル ス の protein gp120 と リ ン パ ball surface の CD4 molecules と の then も レ ド ッ ク ス suppression を by け て い る こ と が Ming ら か と な っ た. Our の results と し て 1) I 々 は P MA に よ る CD4 molecules の 発 now が, acidification ス ト レ ス に よ り suppression さ れ, こ れ ま で に know ら れ て い る セ リ ン 燐 acidification お よ び CD4 と P561ck の stays outside の new し い suppression メ カ ニ ズ ム に よ る こ と を Ming ら か に し た. こ の こ と は, inflammation な ど の acidification ス ト レ ス が HIV ウ イ ル ス の T リ ン パ ball へ の infection を promote す る こ と を in stopping す る. Acidification ストレスによるCD4 is inhibited by メカニズムをさらに検 to する to be determined である. 2) ま た, Jurkat お よ び U937 に を HIV infection さ せ and 経 に チ オ レ ド キ シ ン, Bcl 2 ‐, HIVp24, ア ク チ を ン quantity beg し 検 た. Early infection に ア ポ ト ー シ ス に よ る cell death の period に consistent し て Bcl 2 ‐ と チ オ レ ド キ シ ン の 発 now low を confess め, Bcl 2 ‐ の ア ン チ セ ン ス DNA 発 now transfectant で は HIV infection に よ り コ ン ト ロ ー ル に than し, よ り high rate に ア ポ ト ー シ ス を recognize め た. Now, そ そ undergoes changes in メカニズムと <s:1> てウ <s:1> ス ス ス protein <e:1> and <s:1> analysis を lines って る る る. 3) さ ら に, people living with HIV で の blood チ オ レ ド キ シ ン numerical を sandwitch ELISA に て beg し 検 た と こ ろ, HIV positive group は negative group に than べ て チ オ レ ド キ シ ン は high い tendency が recognize め ら れ た. HIV positive group of の で も, blood チ オ レ ド キ シ ン が high い で は survival during が shortening し て お り after, to accept the result of bad の が ら れ after, to determine の モ ニ タ ー と し て useful で あ る こ と が exam え ら れ た. こ れ は HIV infection が progress し た state で の acidification ス ト レ ス に よ る も の と exam え ら れ, future こ の チ オ レ ド キ シ ン how high numerical が に よ る も の か を さ ら に parsing し て い く こ と が important だ と think わ れ る. こ れ ら の research を tong じ て エ イ ズ pathological に お け る レ ド ッ ク ス abnormal の メ カ ニ ズ ム を analytical し, エ イ ズ pathological measures の を made す る こ と を refers す.

项目成果

Matsui,M.: "Early embrynic lethality caused by targeted disruption of the mouse thioredoxin gene." Develop.Biol.178. 179‐185 (1996)

Matsui, M.：“小鼠硫氧还蛋白基因的靶向破坏引起的早期胚胎致死。”Develop.Biol.179-185 (1996)。

Nakamura H,: "Elevation of plasma thioredoxin levels in HIV‐infected individuals." Int.Immunol.8. 603‐611 (1996)

Nakamura H，：“HIV 感染者血浆硫氧还蛋白水平升高。”Int.Immunol.8 (1996)。

Nakamura,K.: "Alternative binding of p56lck and phosphatidylinositol 3‐kinase in T cells by sulfhydryl oxidation;" Moleculer Immunil.33. 855‐865 (1996)

Nakamura, K.：“通过巯基氧化在 T 细胞中选择性结合 p56lck 和磷脂酰肌醇 3-激酶；”Moleculer Immunil。

K.Hirota,: "AP‐1 Transcriptional Activity is Regulated by a Direct Association between Thioredoxin and ref‐1." Proc Natl Acad Sci USA. (in press).

K. Hirota，：“AP-1 转录活性由硫氧还蛋白和 ref-1 之间的直接关联调节。”Proc Natl Acad Sci USA（正在出版）。

Nakamura,K.: "Inhibition of protein kinase C-mediated CD4 down-regulation by oxidative stress in T lymphocytes." J.Immunol.157. 5339-5349 (1996)

Nakamura,K.：“T 淋巴细胞氧化应激抑制蛋白激酶 C 介导的 CD4 下调。”