腫瘍でのADF/チオレドキシンの活性化機構並びに抗癌剤の影響と作用機序の解析

ADF/硫氧还蛋白在肿瘤中的激活机制及抗癌药物的作用及机制分析

• 批准号: 07274109
• 负责人: 淀井 淳司
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07274109/
• 关键词: ADF; チオレドキシン; 抗癌剤; 耐性; ラジカルスカベンジャー

HTLV-I感染細胞株培養上清中より分離精製されたATL由来因子(ADF)は大腸菌の還元補酵素チオレドキシン(TRX)のヒト相同体であり、その活性部位にあるシスチン残基を介した酸化還元反応により細胞内外の酸化還元環境の維持(レドックス制御)を行っている。ADF/TRXはその還元活性により多彩な機能を有する因子として報告されているが、本研究では、ADF/TRXが多くの腫瘍組織において高発現している事実に着目し、細胞の腫瘍化とADF/TRXはじめとする細胞内レドックス制御機構との関連を解析するとともに、腫瘍細胞の抗癌剤耐性獲得におけるADF/TRXの関与について検討した。さらには、悪性腫瘍患者の血清中ADF/TRXの定量法を開発し、診断、予後判定などの臨床医学における有用性について検討した。その結果、1、シスプラチン、アドリアマイシンなどの活性酸素を産生する抗癌剤に対する耐性と細胞内ADF/TRXの発現量との間に相関を認めた。2、シスプラチン、ブレオマイシンなどの抗癌剤がADF/TRXを発現誘導することを見い出した。また、ADF/TRXを遺伝子導入した細胞株はシスプラチンに対する耐性を獲得したが、これにはADF/TRXの活性酸素消去作用が関与しているものと示唆された。3、抗ADF/TRX抗体を用いたELISAサンドウイッチ法による血清ADF/TRXの定量法を開発し、肝細胞癌患者の血清中においてADF/TRXが有意に高値を示すことを見い出した。4、活性酸素消去系酵素の発現が、癌細胞の増殖能増強、浸潤・転移能の獲得などの生物学的悪性化の進展に関与していることを見い出した。

HTLV-I-infected cell culture supernatant was isolated and purified ATL derived factor (ADF) was used for the regulation of E. coli reductase (TRX) protein identity and the active site of TRX protein residues, as well as for the maintenance of intracellular and extracellular acidifying environment. ADF/TRX has been reported as a factor in the development of its reductive activity and colorful function. In this study, ADF/TRX has been found to be highly active in many tumor tissues. The relationship between ADF/TRX and the acquisition of anticancer resistance in tumor cells has been analyzed. The quantitative method for ADF/TRX in serum of patients with malignant tumors was developed, diagnosed, and evaluated in clinical medicine. The results showed that: 1. The correlation between the expression of ADF/TRX and the tolerance of anticancer agents to active acid production was identified. 2. Anti-cancer agents such as ADF/TRX appear in the media. The cell lines introduced with ADF/TRX have acquired the tolerance to ADF/TRX and the elimination of ADF/TRX has been shown to be resistant to it. 3. Anti-ADF/TRX antibodies were detected in serum by ELISA, and ADF/TRX in serum of hepatocellular carcinoma patients was intentionally high. 4. The development of active acid elimination enzymes, the enhancement of cancer cell proliferation, the acquisition of infiltration and migration, and the progress of biological transformation are related to the development of cancer cells.

项目成果

Sato, N.: "Thiol-mediated redox regulation of apoptosis : Possible roles of cellular thiols other than glutathione in T cell apoptosis." J. Immunol.154. 3194-3203 (1995)

Sato, N.：“硫醇介导的细胞凋亡氧化还原调节：谷胱甘肽以外的细胞硫醇在 T 细胞凋亡中的可能作用。”

Yamada, M.: "Increased expression of thioredoxin/adult T-cell leukemia derived factor in cisplation-resistant human cancer cell lines." Clin. Cancer Res.(in press.). (1996)

Yamada, M.：“顺式耐药人类癌细胞系中硫氧还蛋白/成人 T 细胞白血病衍生因子的表达增加。”

Hamada, J.: "Enhanced effect of epidermal growth factor on pulmonary metastasis and in vitro invasion of rat mammary carcinoma cells." Cancer Lett.89. 161-167 (1995)

Hamada, J.：“表皮生长因子对大鼠乳腺癌细胞肺转移和体外侵袭的增强作用。”

Sasada, T.: "Redox control of resistance to cis-Diamminedichloroplatinum (II) (CDDP): Protective effect of human thioredoxin against CDDP-induced cytotoxicity." J. Clin. Invest.(in press.). (1996)

Sasada, T.：“氧化还原控制顺式二氨二氯铂 (II) (CDDP) 耐药性：人硫氧还蛋白对 CDDP 诱导的细胞毒性的保护作用。”

Yokomizo, A.: "Cellular levels of thioredoxin associated with drug sensitivity to cisplatin, mitomycin C, doxorubicin, and etoposide." Cancer Res.55. 4293-4296 (1995)

Yokomizo, A.：“硫氧还蛋白的细胞水平与顺铂、丝裂霉素 C、阿霉素和依托泊苷的药物敏感性相关。”