真核生物DNA修復反応におけるDNAポリメラーゼβ及びεの役割

DNA 聚合酶 β 和 ε 在真核 DNA 修复反应中的作用

• 批准号: 07255204
• 负责人: 杉野 明雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07255204/
• 关键词: 出芽酵母; DNA修復; DNAポリメラーゼβ; DNAポリメラーゼε; YEL055C

出芽酵母内には染色体DNA複製に関与している三つのDNAポリメラーゼ(I,II及びIII)の他に、DNAポリメラーゼIV,Rev3DNAポリメラーゼ及びミトコンドリア内に存在するDNAポリメラーゼが知られている。最近の酵母ゲノムプロジェクトの結果から酵母染色体DNA上に新たなDNAポリメラーゼ様の蛋白をコードするORFが明らかになった(YEL055C)。本年度はこのORFが実際、新たなDNAポリメラーゼをコードしており、このDNAポリメラーゼのDNA修復反応への関与を検討した。先ずYEL055CをGALプロモーターの下流に挿入しガラクトースによる誘導により蛋白の多量発現を試みた。その結果、ORFより予想される分子量の約120kDa蛋白の特異的な誘導がSDSゲル電気泳動により検出された。次にこの蛋白がDNAポリメラーゼ活性を有するかどうかをactivity gel assayを行なった。その結果新しい誘導された約120kDa蛋白にDNAポリメラーゼ活性が存在することが証明できた。最後に、この新しく同定されたDNAポリメラーゼの修復に於ける役割を検討する目的でこの遺伝子の欠損株を作成し、現在解析を行なっている。

In budding yeasts, DNA replication is involved in the presence of three DNA sequences (I,II, and III), other DNA sequences (IV,Rev 3), and other DNA sequences (IV,Rev 3). The most recent yeast genome analysis results in a new DNA fragment on yeast chromosome DNA and a protein fragment ORF (YEL055C). This year, the ORF has been developed and new DNA repair technologies have been developed. YEL055C is the first GAL to induce protein production in the downstream. As a result, ORFs were expected to induce a specific protein with a molecular weight of about 120kDa. The activity gel assay was performed on the second day of the study. The results showed that there was a new induction of about 120kDa protein in DNA sequencing activity. Finally, the new DNA sequencing and repair method is used to analyze the DNA sequencing and repair of defective plants.

项目成果

Tran,H.T.,et al.: "Replication slippage between distant short repeats in Saccharomyces cerevisiae depends on the direction of replication and the RAD50 and RAD52 genes." Mol. Cell. Biol.15. 5203-5213 (1995)

Tran, H.T., et al.：“酿酒酵母中远距离短重复之间的复制滑动取决于复制方向以及 RAD50 和 RAD52 基因。”

Sugino,A.: "Yeast DNA polymerases and their role at the replication fork." Trends in Biochemical Sciences. 20. 319-323 (1995)

Sugino,A.：“酵母 DNA 聚合酶及其在复制叉中的作用。”