真核生物DNA修復反応におけるDNAポリメラーゼβ及びεの役割

DNA 聚合酶 β 和 ε 在真核 DNA 修复反应中的作用

• 批准号: 06263209
• 负责人: 杉野 明雄
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06263209/
• 关键词: DNA repair; DNA ポリメラーゼβ; DNA ポリメラーゼε; Yeast Saccharomyces cerevisiae; in vitro DNA repair; double strand break repair

1)出芽酵母DNAポリメラーゼIV(高等動物DNAポリメラーゼβのホモログ)の役割高等動物DNAポリメラーゼβのホモログである出芽酵母DNAポリメラーゼIVを完全に欠く突然変異株を使用し各種のDNA修復反応に及ぼす影響を検討した結果、DNAポリメラーゼIVに二本鎖DNA切断修復(double-strand break DNA repair)反応に関与することが明らかになった。また突然変異株では減数分裂時特異的相同性組換え頻度が野生株に比較して10倍程度上昇していた。従って組換え反応の中間体である二本鎖切断部位にDNAポリメラーゼIVは組換え酵素と拮抗して働き、DNA鎖の修復に働いていると考えられる。2)in vitro DNA修復系の構築及びその系でのDNAポリメラーゼII(ε)とIVの働きIn vivoを反映したin vitro DNA修復系の構築を出芽酵母核抽出液より行った。同様にDNAポリメラーゼII(ε)の温度感受性変異株及びDNAポリメラーゼIV欠損株より核抽出液を調製し、UV_-,O_SO_<4->,その他のDNA損傷剤で処理したDNAの修復をin vitroで測定した。その結果、少なくともUV_-,O_SO_<4->,処理したDNAの修復反応にはこれらの二つのDNAポリメラーゼが関与している結果が得られなかった。この結果は、既にTexas大学のE.Friedberg等が発表した結果と相違するものである。

1) Budding yeast DNA ポリメラーゼIV (Higher animal DNA ポリメラーゼβのホモログ)の俪リメラーゼβのホモログであるBudding Yeast DNAポリメラーゼIV is completely due to the sudden change of different strains, and the use of various DNA repair reactions and effects is the result of DNA repair, and the result of DNA repair is double-stranded DNA cleavage repair (double-strand). break DNA repair) 远に关与することが明らかになった. This means that the frequency of the specific homogeneous group replacement during meiosis is increased by 10 times compared to the wild strain.従ってcombination and reverse intermediary である二本 lock cutting part にDNAポリメラーゼIV It replaces the enzyme and antagonizes it, and repairs the DNA lock and repairs it. 2) The construction of the in vitro DNA repair system and the construction of the DNA repair system in vitro are reflected in the construction of the in vitro DNA repair system and the budding yeast nuclear extract solution. The temperature-sensitive heterogeneous strain of DNA Nanarum II (ε) and the NDNA Nanarum IV defective strain are all isolated from the same strain. Liquid release modulation, UV_-, O_SO_<4->, DNA damage treatment, DNA repair treatment It is measured in vitro.その Result, less なくともUV_-,O_SO_<4->, processing したDNA のrepair reaction応にはこれらの二つのDNAポリメラーゼが关与しているRESULTSがgetられなかった.このRESULTSは、E.Friedberg of the University of Texas and others have shown that the results are inconsistent with each other.

项目成果

Leem,Sun-Hee: "The yeast Saccharomyces cerevisiae DNA polymerase IV:possible involvement in double strand break DNA repair" Nucleic Acids Res.22. 3011-3017 (1994)

Leem,Sun-Hee：“酿酒酵母 DNA 聚合酶 IV：可能参与双链断裂 DNA 修复”Nucleic Acids Res.22。