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ショウジョウバエDNAポリメラーゼεの細胞内での役割

果蝇 DNA 聚合酶 ε 的细胞内作用

基本信息

批准号：
05263215
负责人：
杉野明雄
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、遺伝学が進んでいるショウジョウバエDrosophila melanogasterを用い、DNAポリメラーゼεが高等動物細胞や酵母と同様に存在することを証明し、このポリメラーゼの細胞内での役割を分子遺伝学的に明らかにする。本年度は昨年度の研究でクローニングしたD.melanogaster DNAポリメラーゼεをコードするcDNAの全塩基配列を決定した。またこのcDNAを使って染色体DNAの単離を行った。塩基配列より予想されるDNAポリメラーゼεのアミノ酸配列はSaccharomyces cerevisiaeのDNAポリメラーゼIIの遺伝子(POL2)産物のアミノ酸配列と比較するとN端側半分の所(一般にDNAポリメラーゼドメインと呼ばれている所)で約60%の相同性を示した。しかしC端側約半分のところでは約30%の相同性しか示さなかった。一方、単離した完全長のcDNAを出芽酵母S.cerevisiaeのpo12-9またはpo12-18温度感受性変異株に導入したが酵母のDNAポリメラーゼIIの機能を相補できなかった。このことは、分裂酵母のDNAポリメラーゼII遺伝子でさえ出芽酵母のDNAポリメラーゼIIの機能を相補できなかったことからも、DNAポリメラーゼドメインの相同性が非常に高いだけでは十分ではなく、DNAポリメラーゼIIのC端側半分が恐らく他の蛋白因子と相互作用し、DNA複製に重要な働きをしていることを示すものと考えられる。従って現在は、N-端側半分のD.melanogaster遺伝子とC-端側半分のS.cerevisiae遺伝子からなるchimera遺伝子を作製し、S.cerevisiae po12変異株を相補できるか検討中である。

The purpose of this study is to investigate the effects of Drosophila melanogaster and DNA on the molecular biology of cytosol in vivo. In this year's "yesterday's" study, we will make a decision on the whole basis of the study, which is called "D.melanogaster DNA", "D.melanogaster DNA", "ε", "cDNA". The cDNA causes the chromosome DNA to be separated from the line. I would like to know that there is a difference in the number of compounds (POL2) between Saccharomyces cerevisiae and DNA (POL2) than that in the N-terminal half-split (general DNA), which is about 60% identical. The C-terminal is about half-divided, about 30% identical, indicating that it is similar. On the one hand, completely isolated cDNA produced budding yeast S.cerevisiae