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基本転写因子の機能と転写制御機構

转录因子的基本功能和转录控制机制

基本信息

批准号：
07258220
负责人：
北嶋繁孝
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)転写因子TFIIFは、RNAポリメラーゼIIによる転写開始とmRNA合成の伸長反応に関与する生物にとって必須な転写因子である。TFIIFはRAP30とRAP74とのヘテロテトラマ-である。TFIIFの構造生物学を目的に現在その高次構造の解析を進めているが、今回、昆虫細胞に発現させたリコンビナントIIFを用いてトリプシンによる限定分解を行なった。その結果、RAP74はRAP30より強いトリプシン感受性を示し、おそらくRAP30は内側に存在し、RAP74は外側に配位していることを疑わせた。さらに、RAP74の分解はセントラル領域と呼ばれるチャージに富むドメインがきわめて分解されやすく、N-,C-未領域はトリプシンに抵抗性を示した。このことから、RAP74はN-,C-末でグロブユラ-な構造をとっており、その間の領域は確かな構造をとらず、タンパクの外面を向いていることを示唆した。また、TBP,IIB,PolIIとプロモーターDNAとでDBPolF複合体を作らせたとき、RAP30はトリプシン消化から保護されたが、RAP74のセントラルドメインの分解には変化がなかった。これまでに、RAP74のこの領域は種々のリン酸化を受けやすい事、SRFなどの転写制御因子との作用部位であることがわかっている。この知見は高次構造の理解に参考になると思われる。2)細胞周期でPolII基本転写活性が変化することを見いだした。結果は、PolIIインヴィトロ転写活性が、S/G2期で低く初期G1期で高いことがわかった。この違いは、TFIID活性によってもたらされるが、TBPの発現量には変化がなく、また、S/G2期に転写のレプレッサーが存在するということもなかった。TFIIDはTBP/TAFから構成されるので、細胞周期でのTFIID活性の変動はTAFによって制御されているのかも知れない。一方、PolIII因子であるTFIIIB(sBPとPolIIITAFとで構成される)についても細胞周期M期で活性が低下することが報告され、TBPとTAFの複合体の制御の可能性が強く示唆される。

1) The writing factor TFIIF, the RNA level II, the start of mRNA synthesis, the elongation reaction, and the biosynthesis must be related to the writing factor. TFIIFはRAP30とRAP74とのヘテロテトラマ-である. TFIIF's Structural Biology を Purpose に Now その Higher-order Structure の Analysis を Advance めているめているが, This Chapter, Insects The cells are now in use and the cells are limited to decompose them.そのRESULT、RAP74はRAP30より强いトリプシンsensitivity をshowし、おそらくRAP30 is present on the inner side, and RAP74 is coordinated on the outer side.さらに、RAP74のbreakdownはセントラル区と氰れるチャージに富むドメインがきわめて decomposition されやすく, N-,C-unfield はトリプシンにresistant をshow した.このことから、RAP74はN-,C-last でグロブユラ-なstructure をとっており、そThe field of no room is the same as the structure, and the outside of the room is the same as the outside.また、TBP,IIB,PolIIとプロモーターDNAとでDBPolF complex を作らせたとき,RA P30 はトリプシン digestion and protection されたが, RAP74 のセントラルドメインのdegradation には変化がなかった.これまでに、RAP74のこの区はkind々のリン acidification をReceived けやすい事, SRFなどの転writes the control factor and the action part of it.この知见は Higher order structure and understandingにreferenceになると思われる. 2) The basic activity of PolII in the cell cycle is changed and changed. As a result, the PolII activity was low, the S/G2 phase was low, and the early G1 phase was high and the activity was high.このviolationいは, TFIID active によってもたらされるが, TBP の発真人には変化がなく、また、S/G2 issue に転写のレプレッサーがexistent するということもなかった. TFIID is composed of TBP/TAF and the cell cycle is active. One side, PolIII factor TFIIIB (sBP とPolIIITAF とで constitute される) についても fine The activity of the M phase of the cell cycle is low and the possibility of control of the TBP and TAF complexes is strong and strong.