基本転写因子の機能と転写制御機構

转录因子的基本功能和转录控制机制

• 批准号: 06266203
• 负责人: 北嶋 繁孝
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06266203/
• 关键词: 基本転写因子TFIIF; リン酸化制御; 転写開始複合体; シグマホモロジー

1)基本転写因子TFIIFのリン酸化による機能制御TFIIFはRAP30、RAP74のサブユニットからなるヘテロテトラマ-である。RAP30はRNAポリメラーゼIIと結合し本酵素をDB複合体にリクルートする働きがあるが、さらにRAP30はポリメラーゼIIと結合するとそのDNA結合活性がアンマスクされプロモーターDNAと非特異的に結合し、転写開始複合体を安定化させる。一方、RAP74は、転写開始から数baseのtranscript合成後の極めて早期に作用して、ポリメラーゼIIのプロモーターからのエスケープに働くとされる。またRAP74は、in vivoでは強くリン酸化されており、事実、180-356アミノ酸領域には、A-キナーゼ、C-キナーゼ、CaseinキナーゼIIによりリン酸化される部位が存在し、特に,306,340,346にはCK-IIによるリン酸化のコンセンサス配列が集簇している。今回、脱リン酸化RAP74(大腸菌によるリコンビナント)とリン酸化RAP74(HeLa細胞)との性質をin vitroで比較することにより、RAP74が転写開始複合体形成を制御出来ること、そのリン酸化はポジテイヴに機能調節していることを示した。基本転写因子の機能がリン酸化によって制御されることを示したはじめての報告である(J.Biol.Chem.1994)。2)RAP74のE.coli転写系の促進作用大腸菌のin vitro転写系はcoreRNAポリメラーゼとシグマ因子とで起こり、真核細胞に比べ転写反応にかかわる因子の数は少なく、その転写開始反応機構についてははよく研究されている。一方、TBP,IIB,IIE,IIFには、シグマホモロジーが散見され、各因子とシグマ因子との機能的関連性が示唆されている。そこで、これらの大腸菌転写系に及ぼす効果を調べたところ、TFIIF,しかもRAP74がバクテリアの転写を遺伝子非特異的に促進することがわかった。RAT74の作用展は転写開始反応であり、RNAポリメラーゼの遺伝子プロモーターへの結合を促進した。しかし、シグマ因子に置き変わることはではなかった。更に、RAP74のdeletion mutantをテストしたところ、この作用はRAT74のシグマホモロジー領域にマップできず、TBP,IIB,IIE,RAP30に作用がないことから、シグマホモロジー以外のRAP74特異的な機能であると考えられた(Biochem.Biophys.Acta.1994)。

1) basic planning write factor TFIIF の リ ン acidification に よ る function suppression TFIIF は RAP30, RAP74 の サ ブ ユ ニ ッ ト か ら な る ヘ テ ロ テ ト ラ マ - で あ る. RAP30 は RNA ポ リ メ ラ ー ゼ II と combining し を DB this enzyme complex に リ ク ル ー ト す る 働 き が あ る が, さ ら に RAP30 は ポ リ メ ラ ー ゼ II と combining す る と そ の DNA binding activity が ア ン マ ス ク さ れ プ ロ モ ー タ ー DNA と nonspecific に combined し and planning to write complex を stabilization さ せ る. Side, RAP74 は, planning to write started か ら number base の transcript after synthetic の extremely め て early に role し て, ポ リ メ ラ ー ゼ II の プ ロ モ ー タ ー か ら の エ ス ケ ー プ に 働 く と さ れ る. Youdaoplaceholder0 RAP74 また, in Strong vivo で は く リ ン acidification さ れ て お り, things be, 180-356 ア ミ ノ acid field に は, A - キ ナ ー ゼ, C - キ ナ ー ゼ, Casein キ ナ ー ゼ II に よ り リ ン acidification さ れ る parts が し, に, 306340346 に は CK - II に よ る リ ン acidification の コ ン セ ン サ ス match column が cluster Youdaoplaceholder0 て る. Today, back off リ ン acidification RAP74 (coliform に よ る リ コ ン ビ ナ ン ト) と リ ン acidification RAP74 (HeLa) と の nature を in Vitro で compare す る こ と に よ り, RAP74 が planning writing began to form complex を suppression out る こ と, そ の リ ン acidification は ポ ジ テ イ ヴ に functional regulation し て い る こ と を shown し た. Basic planning write function of factor の が リ ン acidification に よ っ て suppression さ れ る こ と を shown し た は じ め て の report で あ る (J.B iol. Chem., 1994). 2) RAP74 の e.c. with our fabrication: oli planning write の promote role coliform の in vitro planning write department は coreRNA ポ リ メ ラ ー ゼ と シ グ マ factor と で up こ り, eukaryotic cells に than べ planning to write an 応 に か か わ る factor less number of の は な く, そ の planning to write the 応 agency に つ い て は は よ く research さ れ て い る. One party, the TBP, IIB, IIE, the IIF に は, シ グ マ ホ モ ロ ジ ー が shi kan さ れ, each factor と シ グ マ factor と の function of masato even sex が in stopping さ れ て い る. そ こ で, こ れ ら の coliform is planning to write に and ぼ す unseen fruit を adjustable べ た と こ ろ, TFIIF し か も RAP74 が バ ク テ リ ア の planning write を heritage 伝 son nonspecific に promote す る こ と が わ か っ た. RAT74 の role show は planning write start against 応 で あ り, RNA ポ リ メ ラ ー ゼ の heritage 伝 son プ ロ モ ー タ ー へ の combining を promote し た. The factors に of <s:1> and シグ シグ に are set to a わる variation of わる な と で で な な った った. Youdaoplaceholder0, RAP74 deletion Mutant を テ ス ト し た と こ ろ, こ の role は RAT74 の シ グ マ ホ モ ロ ジ ー field に マ ッ プ で き ず, the TBP, IIB, IIE, RAP30 に role が な い こ と か ら, シ グ マ ホ モ ロ ジ ー outside の RAP74 function of specific な で あ る と exam え ら れ た (Biochem. Biophys Acta.1994.

项目成果

Kitajima,S.et al.: "Regulation of the human general tranecuption facfor TFIIF by phosphorylation" J.Biol.Chem.269. 29970-29977 (1994)

Kitajima,S.et al.：“通过磷酸化调节人类一般传热因子 TFIIF”J.Biol.Chem.269。

Chibazakura,T.et al.: "Enhancement of bacterial tramuiption in itro by 74KDa subunit of TFIIF" Biochim.Biophys.Acta. 1219. 592-600 (1994)

Chibazakura,T.et al.：“TFIIF 74KDa 亚基对体外细菌损伤的增强”Biochim.Biophys.Acta。