权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

基本転写因子の機能と転写制御機構

转录因子的基本功能和转录控制机制

基本信息

批准号：
06266203
负责人：
北嶋繁孝
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)基本転写因子TFIIFのリン酸化による機能制御TFIIFはRAP30、RAP74のサブユニットからなるヘテロテトラマ-である。RAP30はRNAポリメラーゼIIと結合し本酵素をDB複合体にリクルートする働きがあるが、さらにRAP30はポリメラーゼIIと結合するとそのDNA結合活性がアンマスクされプロモーターDNAと非特異的に結合し、転写開始複合体を安定化させる。一方、RAP74は、転写開始から数baseのtranscript合成後の極めて早期に作用して、ポリメラーゼIIのプロモーターからのエスケープに働くとされる。またRAP74は、in vivoでは強くリン酸化されており、事実、180-356アミノ酸領域には、A-キナーゼ、C-キナーゼ、CaseinキナーゼIIによりリン酸化される部位が存在し、特に,306,340,346にはCK-IIによるリン酸化のコンセンサス配列が集簇している。今回、脱リン酸化RAP74(大腸菌によるリコンビナント)とリン酸化RAP74(HeLa細胞)との性質をin vitroで比較することにより、RAP74が転写開始複合体形成を制御出来ること、そのリン酸化はポジテイヴに機能調節していることを示した。基本転写因子の機能がリン酸化によって制御されることを示したはじめての報告である(J.Biol.Chem.1994)。2)RAP74のE.coli転写系の促進作用大腸菌のin vitro転写系はcoreRNAポリメラーゼとシグマ因子とで起こり、真核細胞に比べ転写反応にかかわる因子の数は少なく、その転写開始反応機構についてははよく研究されている。一方、TBP,IIB,IIE,IIFには、シグマホモロジーが散見され、各因子とシグマ因子との機能的関連性が示唆されている。そこで、これらの大腸菌転写系に及ぼす効果を調べたところ、TFIIF,しかもRAP74がバクテリアの転写を遺伝子非特異的に促進することがわかった。RAT74の作用展は転写開始反応であり、RNAポリメラーゼの遺伝子プロモーターへの結合を促進した。しかし、シグマ因子に置き変わることはではなかった。更に、RAP74のdeletion mutantをテストしたところ、この作用はRAT74のシグマホモロジー領域にマップできず、TBP,IIB,IIE,RAP30に作用がないことから、シグマホモロジー以外のRAP74特異的な機能であると考えられた(Biochem.Biophys.Acta.1994)。

1)The basic writing factor TFIIF controls the function of RAP30 and RAP74. RAP30 binds to the DNA binding activity of the enzyme DB complex and stabilizes the DNA binding activity of the enzyme DB complex. One side, RAP74, the beginning of writing, the number of base transcrip synthesis, the extreme early action, the separation of the two sides, the separation of the two sides, the separation of the two sides. RAP74 in vivo is a strong acid domain, A-, C-, Casein-, II-, II-, III-, IV-, IV-, IV, IV, In this paper, we compare the properties of RAP74 (HeLa cells) and RAP74 (Escherichia coli) in vitro. The basic function of the writing factor is to control the acidity of the sample (J.Biol.Chem.1994). 2) Promotional effect of RAP74 and E.coli gene expression system in vitro Escherichia coli gene expression system is coreRNA gene expression factor, the number of gene expression factor in eukaryotic gene expression system is less than that in eukaryotic gene expression system, and the number of gene expression factor in eukaryotic gene expression system is less than that in eukaryotic gene expression system. The relationship between the functions of a single factor, TBP,IIB,IIE,IIF, and the functions of each factor is shown. The E. coli genome and its effects are regulated by TFIIF, RAP74 and non-specific promoters. RAT74's role is to promote the combination of RNA and DNA.しかし、シグマ因子に置き変わることはではなかった。In addition, RAP74's deletion mutant is used in RAT74's domain, TBP,IIB,IIE,RAP30's function is used in RAP74's unique function (Biochem.Biophys.Acta.1994).