ジーンターゲティングによる生体防御反応の解析

通过基因靶向分析生物防御反应

• 批准号: 07260219
• 负责人: 吉田 進昭
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07260219/
• 关键词: ジーンターゲティング; 転写因子; NF-IL6; NF-IL6β; Ig; EBP; マクロファージ; サイトカイン; リステリア

NF-IL6およびNF-IL6βはロイシンジッパー構造を有する転写調節因子であり、いずれもC/EBPファミリーに属する。これらの転写因子はともに炎症性の刺激によって発現が強く誘導され、in vitroでの解析から急性期蛋白やサイトカイン遺伝子の転写を相乗的に活性化することが示唆されている。昨年度、我々はNF-IL6欠損マウスの解析を通じてNF-IL6がマクロファージの細胞内殺菌、腫瘍障害活性、G-CSFの転写活性化に重要な転写因子であることを明らかにした。本年度はNF-IL6β欠損マウスを作製、解析を行ったが、NF-IL6マウスと異なりリステリア感染に対する感受性はみられず、またマクロファージのサイトカイン産生能にも異常が認められなかった。またテルペン油投与による局所炎症に対する肝臓の急性期蛋白誘導にも異常はなかった。NF-IL6による機能の代償も考えられるため、現在NF-IL6およびNF-IL6βをともに欠損するダブルノックアウトマウスを作製し、解析を続けている。一方、同じC/EBPファミリーに属するIg/EBPは、免疫グロブリンH鎖のエンハンサーおよびプロモーター領域に結合する転写因子として単離され、B細胞やマクロファージにおいて発現が強い。また、IL-4とLPS刺激によるIgG_1とIgEへの免疫グロブリンクラススイッチの際にgermline transcriptの発現を誘導することが知られている。ジーンターゲティングにより作製が試みられたIg/EBP欠損マウスであるが、ヘテロ接合体どうしの交配から生まれるホモ接合体はわずか5%であり、大部分は胎生期に死亡していることが明らかとなった。現在このマウスの死因を解析中である。なお、生き延びたホモ接合体の成熟T、B細胞分画には異常が認められていない。

NF-IL6和NF-IL6β是具有亮氨酸拉链结构的转录调节剂，都属于C/EBP家族。这两个转录因子都通过炎症刺激强烈诱导，并且体外分析表明它们协同激活急性相蛋白和细胞因子基因的转录。去年，我们透露，NF-IL6是巨噬细胞内细胞内杀菌，肿瘤受伤活性和G-CSF的转录激活的重要转录因子。今年，产生和分析了NF-IL6β缺陷小鼠，但是与NF-IL6小鼠不同，没有对李斯特菌感染的敏感性，并且在巨噬细胞的细胞因子生产能力中未观察到异常。此外，肝脏中急性相蛋白的异常诱导针对由萜烯油给药引起的局部炎症。由于NF-IL6的功能也被认为是补偿的，因此我们目前正在创建双基因敲除小鼠NF-IL6和NF-IL6β缺陷，并继续进行分析。另一方面，属于同一C/EBP家族的Ig/EBP被分离为与免疫球蛋白H链的增强子和启动子区域结合的转录因子，并且在B细胞和巨噬细胞中高度表达。众所周知，在通过IL-4和LPS刺激下切换到IgG_1的免疫球蛋白类别和IgE时，诱导种系转录本的表达。尽管试图通过基因靶向产生IG/EBP缺陷的小鼠，但只有5％的小鼠是通过杂交杂合体纯合的，并且发现大多数人在胎儿生命中死亡。该老鼠的死亡原因目前正在分析中。另外，在存活的纯合体的成熟T和B细胞部分中未观察到异常。

项目成果

吉田進昭: "IL-6関連遺伝子ノックアウトマウス" 病態生理. 14. 982-988 (1995)

S. Yoshida：“IL-6 相关基因敲除小鼠”病理生理学 14. 982-988 (1995)。

S. Akira et al.: "Transcription factors NF-IL6 and APRF involved in gp130-mediated signaling pathway" Ann. NY Acad, Sci.762. 15-27 (1995)

S. Akira 等人：“转录因子 NF-IL6 和 APRF 参与 gp130 介导的信号通路”Ann。

吉田進昭: "IL-6およびレセプター関連遺伝子ノックアウトマウス" 臨床免疫. 28(印刷中). (1996)

S. Yoshida：“IL-6 和受体相关基因敲除小鼠”《临床免疫学》28（出版中）。