トランスジェニックマウスを用いたVEGF-CおよびAng-2の機能解析

使用转基因小鼠进行 VEGF-C 和 Ang-2 的功能分析

• 批准号: 18013020
• 负责人: 吉田 進昭
• 金额: $ 4.61万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18013020/
• 关键词: トランスジェニックマウス; VEGF-C; Angiopoietin-2; 血管; リンパ管; 内皮細胞; SV40 tsA58T抗原

本研究課題では、Cre/loxPシステムを利用した、VEGF-CあるいはAng-2をコンディショナルに発現するトランスジェニックマウスを用いた解析によって、正常発生過程での血管・リンパ管形成におけるそれぞれの増殖因子の役割を明らかにすることを目的とした。平成19年度では、以下の研究を進めた。1)タモキシフェン誘導型Creリコンビナーゼを広範囲の組織で発現するトランスジェニックマウスと、VEGF-CあるいはAng-2をコンディショナルに発現するトランスジェニックマウスとの2重トランスジェニックマウスを得た後、タモキシフェンの投与によってCre/loxP遺伝子組換えを誘導することで、VEGF-CおよびAng-2の血管・リンパ管形成における機能を解析した。組織特異的Creトランスジェニックマウスの場合に見られた致死的な形態形成異常を回避し、成体での解析が可能となった。2)変異型SV40 large T抗原、tsA58T抗原を内皮細胞特異的に発現するトランスジェニックマウスより、内皮細胞共通の性質および臓器特異的内皮細胞の性質を保持した内皮細胞の長期培養系の確立に成功した。また、子宮および腸間膜より内皮細胞を分離した後、抗Lyve-1抗体を用いた磁気細胞分離法によって血管・リンパ管内皮細胞を得る実験系を確立した。VEGFR-3はリンパ管内皮細胞において強く発現していたが、VEGF-Cによる刺激では、血管・リンパ管内皮細胞の両方で細胞内シグナル伝達分子のリン酸化が誘導された。このことから、腫瘍細胞が産生するVEGF-Cに対して血管・リンパ管内皮細胞の両方が応答する可能性が、改めて示唆された。

This study aims to analyze the use of Cre/loxP gene and VEGF-C gene in Ang-2 gene expression, and to clarify the role of VEGF-C gene in the development of vascular endothelial cells during normal development. Heisei 19 year, the following research. 1) Cre/loxP induced by Cre VEGF-C and Ang-2 have been analyzed for their function in the formation of vascular endothelial cells. Tissue-specific Cre can be detected in cases where lethal morphogenesis is abnormal, and adult analysis is possible. 2) The successful establishment of endothelial cell culture lines with SV40 large T antigen and tsA58 T antigen as endothelial cell-specific antigens, endothelial cell-common properties and organ-specific endothelial cell properties. After isolation of endothelial cells from uterus and intestine, anti-Lyve-1 antibody was used to establish a system of vascular endothelial cells isolated by magnetic cell isolation method. VEGFR-3 is strongly expressed in vascular endothelial cells, and VEGF-C is stimulated to induce intracellular expression of VEGFR molecules in vascular endothelial cells. The possibility of VEGF-C production in vascular endothelial cells is discussed.

项目成果

MT4-MMP-deficient mouse strain representing an efficient tracking system for MT4-MMP/MMP-17 expression in vivo using β-galactosidase.

MT4-MMP 缺陷小鼠品系代表使用 β-半乳糖苷酶体内 MT4-MMP/MMP-17 表达的有效跟踪系统。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Genes to Cells 12
• 作者: Rikimaru;A.
• 通讯作者: A.

Efficient sequential gene regulation via FLP- and Cre-recombinase using adenovirus vector in mammalian cells including mouse ES cells

• DOI: 10.1111/j.1348-0421.2006.tb03850.x
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
• 影响因子: 2.6
• 作者: Kondo, Saki;Takahashi, Yuzuka;Saito, Izumu
• 通讯作者: Saito, Izumu

Development of a new method for isolation and long-term culture of organ-specific blood vascular and lymphatic endothelial cells of the mouse

小鼠器官特异性血管和淋巴内皮细胞分离和长期培养新方法的建立

• 发表时间: 2008
• 期刊: FEBS J. 275(peer-reviewed)
• 作者: Yamaguchi T;Ichise T;Iwata O;Hori A;Adachi T;Nakamura M;Yoshida N;Ichise H.
• 通讯作者: Ichise H.

Genetic marking of hematopoietic stem and endothelial cells:: identification of the Tmtsp gene encoding a novel cell surface protein with the thrombospondin-1 domain

• DOI: 10.1182/blood-2005-09-3747
• 发表时间: 2006-06-01
• 期刊: BLOOD
• 影响因子: 20.3
• 作者: Takayanagi, Shin-ichiro;Hiroyarna, Takashi;Nakauchi, Hiromitsu
• 通讯作者: Nakauchi, Hiromitsu