細胞周期におけるレチノブラストーマタンパクの機能制御

细胞周期中视网膜母细胞瘤蛋白的功能调节

• 批准号: 07272239
• 负责人: 畠山 昌則
• 金额: $ 19.01万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07272239/
• 关键词: レチノブラストーマタンパク; p130; E2F; 細胞周期; サイトカイン; 癌抑制遺伝子; 細胞増殖; レチノブラストーマ(RB)遺伝子; リン酸化; サイクリン; サイクリン依存性キナーゼ; 酵母

1。造血系細胞における厳密な外来遺伝子の発現抑制を可能にする系を用いてヒトpRBcDNAをサイトカイン依存性リンパ球細胞株を、Ba/F3に導入し、誘導時において非誘導時の50倍程度のpRB蛋白蓄積をしめす安定変異株複数樹立した。これら細胞の細胞周期進行過程、細胞増殖曲線等を検討した結果、pRB非誘導・誘導における有意な増殖能変化は認められなかった。2。pRBはリン酸化を受けて不活化されるため、次にサイクリン-CDKの標的となりうる18個のセリン、スレオニン残基をアラニンに置換した人工改変pRB分子を作製した。この人工改変pRB分子をBa/F3細胞株に導入し細胞増殖に及ぼす効果を検討したところ、わずかな細胞増殖抑制が認められるのみで、細胞周期は停止することなく進行した。3。上記発現誘導系を用いて、pRB関連分子をBa/F3細胞株に導入し蛋白誘導を行なったところp130を導入発現することによりきわめて強力な細胞増殖抑制活性が認められた。4。その活性がp130により抑制されることが知られているE2F4をBa/F3細胞株に導入し蛋白誘導を行なった。その結果、E2F4を構成的に発現させることにより、Ba/F3細胞のサイトカイン依存性が消失し、細胞は増殖因子非依存的増殖応答能を獲得した。本研究から、これまですべての体細胞増殖におけるブレーキ分子として細胞周期制御に普遍的に関与すると考えられてきたpRBがサイトカイン依存性の造血系細胞増殖制御に際してきわめて限定的な役割しか担っていないことが明らかになった。本研究はpRB不応答性細胞の存在を示した最初の報告である。さらに、この細胞の増殖はpRB関連分子のひとつであるp130により強力に抑制された。この事実はある種の血球系細胞において、pRBではなくp130を負の制御因子として有する細胞周期制御機構の存在を示している。この結論は、p130の標的分子と考えられているE2F4の異所性発現によりBa/F3細胞が増殖因子非依存性増殖能を獲得することからも強く支持された。

one. The hematopoietic cell cycle was highly sensitive to the presence of foreign genes. It was possible to detect the number of stable strains of pRBcDNA protein storage stable strains in the presence of cell lines, Ba/F3 cell lines, pRB protein storage proteins and stable strains. The results of the process of cell cycle, the curve of cell colonization and so on, and the intentional colonization of pRB non-pilot cells. two. The acidification of pRB is affected by the inactivation of the enzyme, the sub-activation of the CDK, the determination of the residue of the 18 compounds, and the modification of the pRB molecule by manual modification. The cell line of pRB molecule Ba/F3 was artificially modified into the cell culture and the results showed that the cell colonization was inhibited and the cell cycle was stopped. three. In the previous record, we used the pRB molecule Ba/F3 cell line to transfer the protein into the cell line. The p130 gene was introduced into the cell line. four. The cell line of E2F4 Ba/F3 cell line was cloned into the protein vector to express the protein. The results showed that the phenotype of E2F4 was significantly higher than that of the control group, the dependence of Ba/F3 cells disappeared, and the colonization of cell-independent colonies could be successful. The purpose of this study is to study the regulation of cell cycle in vivo and in vivo. In this study, we studied the regulation of cell cycle in vivo and in vivo. In this study, we studied the regulation of cell cycle in the system of hematopoiesis. in this study, we studied the regulation of cell cycle in the system of hematopoiesis. in this study, we studied the regulation of cell cycle in the system of hematopoiesis in this study. In this study, there is an initial report on the existence of pRB non-responders. The cell colonies of pRB, the molecule, the p130, the potent inhibition of the growth of the virus. The control factors of cell cycle control, cell cycle control, cell cycle control, The molecular analysis of p130 genes showed that the cellular colonization factors of Ba/F3 cells were not dependent on the ability of E2F4 colonization.

项目成果

畠山昌則: "分子腫瘍学" 佐藤昇志、菊地浩吉, 487 (1996)

Masanori Hatakeyama：“分子肿瘤学” Shoshi Sato，Kokichi Kikuchi，487（1996）

HATAKEYAMA,M: "The cancer cell and the cell cycle." Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biol.59. 1-10 (1995)

HATAKEYAMA，M：“癌细胞和细胞周期。”

畠山 昌則: "RB癌抑制遺伝子産物-その上流と下流" 実験医学(増刊). Vol.15 No.16. 86-91 (1997)

Masanori Hatakeyama：“RB肿瘤抑制基因产物-其上游和下游”实验医学（特刊）第15卷第16期（1997年）。

前田達哉、畠山昌則: "RB癌抑制遺伝子と細胞周期" 血液・腫瘍科. (印刷中).

Tatsuya Maeda，Masanori Hatakeyama：“RB 肿瘤抑制基因和细胞周期”，血液学和肿瘤学系（正在出版）。

前田達哉, 畠山昌則: "RB癌抑制遺伝子と細胞周期" 血液・腫瘍科. 第34巻第4号. 271-277 (1997)

Tatsuya Maeda，Masanori Hatakeyama：“RB 肿瘤抑制基因和细胞周期”，血液学和肿瘤学系，第 34 卷，第 4 期。271-277 (1997)