RNAポリメラーゼII転写伸長因子が支配する遺伝子群の動的解析

RNA聚合酶II转录延伸因子控制基因的动态分析

基本信息

  • 批准号:
    12028201
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2001
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ELLやElonginに代表される転写伸長因子はRNAポリメラーゼIIの一時休止や停止を抑え、mRNA転写速度を促進する一群の蛋白分子である。本研究はELLを中心に用い、細胞内における転写伸長因子の機能的役割を明らかにすることを目的とした。まず、哺乳動物細胞において厳密な外来遺伝子の発現誘導を可能にするTcIP promoterを用い、ELL cDNAをサイトカイン依存性の造血系細胞であるBaF3細胞株に安定的に導入した。得られた安定変異細胞株においてELLを誘導的に発現させた結果、同分子は細胞増殖を抑制することが明らかとなった。同様の結果は、ELL相同分子であるELL2を用いても再現された。また、ELLと類似の転写伸長活性を有するElongin Aのアミノ酸配列情報をもとに新規ヒト分子Elongin A2をコードするcDNAを単離した。Elongin A mRNAは広い細胞種・細胞系列において構成的に発現されるのに対し、Elongin A2のmRNA発現は精巣特異的であった。さらに、組み換えElongin A2を用い、試験管内転写伸長アッセイを行った結果、同分子はRNA polymerase IIの転写伸長促進活性を有することが明らかとなった。Elongin Aの場合、その転写伸長活性は調節分子と考えられているElongin B/Cとの結合により増強されるのに対し、Elongin A2の転写伸長活性はElongin B/Cにより全く影響を受けなかった。今回樹立に成功したELL誘導発現細胞を用い、DNA chip解析を通してELL誘導前後のmRNA間において発現レベルが有意に変動する遺伝子群を同定し、細胞増殖制御とELL標的遺伝子群の関連を追求していく予定である。また、Elongin A2の組織特異的な役割ならびにその機能制御機構を検討していく予定である。
ELL/Elongin represents a group of protein molecules that inhibit RNA transcription and promote mRNA transcription. The purpose of this study is to clarify the role of ELL in the central and intracellular functions of elongation factors. The stable introduction of TcIP promoter and ELL cDNA into BaF3 cell line is possible for induction of expression of foreign genes in mammalian cells. The results of the study showed that the growth of the cells was stable. The same result, ELL the same molecule, ELL2, is reproduced in the middle. Elongation activity is similar to that of Elongin A2. Elongin A mRNA is expressed in cell species and cell series, while Elongin A2 mRNA is expressed in sperm specific cells. In addition, the use of Elongin A2 in the test tube results in the presence of RNA polymerase II in the same molecule. In the case of Elongin A, the elongation activity of Elongin B/C is affected by the combination of Elongin A and Elongin A. This study successfully established the relationship between the expression of mRNA before and after ELL induction and the identification of gene groups with intentional changes, and the relationship between cell proliferation control and ELL target gene groups. Elongin A2's organization-specific service and functional control mechanisms are discussed.

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hatakeyama.M: "Identification and Characterization of Elongin A2, a new member of the elongin family of transcription elongation factors, specifically expressed in the testis."The journal of biological chemistry. 275. 6546-6552 (2000)
Hatakeyama.M:“Elongin A2 的鉴定和表征,Elongin A2 是转录延伸因子 elongin 家族的新成员,在睾丸中特异性表达。”生物化学杂志。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hatakeyama.M: "β 3-endonexin as a novel inhibitor of cyclin A-asssociated kinase."Biochemical and biophysical research communications. 267. 947-952 (2000)
Hatakeyama.M:“β 3-内毒素作为细胞周期蛋白 A 相关激酶的新型抑制剂。”生物化学和生物物理研究通讯。 267. 947-952 (2000)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hatakeyama.M: "Collective Inhibition of pRB Family Proteins by Phosphorylation in Cells with p16^<INK4a> Loss or Cyclin E 0verexpression."The journal of biological chemistry. (in press). (2001)
Hatakeyama.M:“p16^<INK4a> 丢失或细胞周期蛋白 E 0 过度表达的细胞中磷酸化对 pRB 家族蛋白的集体抑制。”生物化学杂志。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hatakeyama.M: "Human p55CDC/Cdc20 associates with cyclin A and is phosphorylated by cyclin A-Cdk2 complex."Biochemical and biophysical research communications. 268. 530-534 (2000)
Hatakeyama.M:“人类 p55CDC/Cdc20 与细胞周期蛋白 A 结合,并被细胞周期蛋白 A-Cdk2 复合物磷酸化。”生物化学和生物物理研究通讯。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hatakeyama.M: "Ras and STAT are essential and sufficient downstream components of JAKs in cell proliferation"Japanese Journal of Cancer Research. 93. 527-533 (2000)
Hatakeyama.M:“Ras 和 STAT 是 JAK 在细胞增殖中必需且充分的下游成分”,《日本癌症研究杂志》。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
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畠山 昌則其他文献

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  • DOI:
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    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
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    2000
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    2011
  • 资助金额:
    $ 1.22万
  • 项目类别:
Neonatal Infections and Memory T c ell Repertoire R00
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    2011
  • 资助金额:
    $ 1.22万
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  • 批准号:
    0918832
  • 财政年份:
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  • 资助金额:
    $ 1.22万
  • 项目类别:
    Continuing Grant
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知道了