Rasタンパク質を介するシグナル伝達系の解析

Ras蛋白介导的信号转导系统分析

• 批准号: 07273222
• 负责人: 上代 淑人
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07273222/
• 关键词: Ras; IL-3; MAPチナーゼ; GTP結合タンパク質; 細胞内シグナル伝達

Ras蛋白質を介するシグナル伝達系は、繊維芽細胞では細胞増殖、褐色細胞腫PC12細胞では神経分化に関与している。血球細胞においても、RasはIL-2、IL-3などのサイトカインや、T細胞レセプターからのシグナル伝達系で分子スイッチとして機能している。しかし、サイトカインのもつ増殖誘導、細胞死阻止、分化などの多面的な機能のうち、どの機能をRasが担っているのか明らかにされていない。そこで本研究ではこの点を明らかにすることを目的として、優性抑制変異体Ras(S17N)を誘導発現させるシステムを用い、IL-3依存性プロB細胞株BaF3でのIL-3からのシグナル伝達系におけるRasの機能を解析した。Ras(S17N)を誘導的に高発現するクローン(N6細胞)において、Rasの下流で機能しているMAPキナーゼのIL-3刺激によるリン酸化(活性化)を検討したところ、Ras(S17N)を誘導したときに阻害が認められた。そこで次にRas(S17N)存在下、非存在下でのN6細胞の増殖を細胞数の計測、およびMTT法により比較した。その結果、Ras(S17N)の発現は、N6細胞の増殖には全く影響しなかった。以上の結果から、BaF3細胞においては、1)IL-3刺激によるMAPキナーゼの活性化はRasを介すること、2)IL-3依存的な細胞増殖にはRasが必要ないことが明らかとなった。現在、同様の発現系を用いた、活性変異型Ras(G12V)の効果の検討などにより、IL-3からのシグナル伝達系におけるRasの機能をさらに詳細に解析中である。

Ras protein induces cell culture, cell proliferation, brown cell differentiation, PC12 differentiation and differentiation. Cell cycle, IL-3 IL-2, IL-2, IL-2, The mechanism of differentiation, the prevention of cell death, the prevention of cell death, the prevention of The purpose of this study is to demonstrate that Ras (S17N), a sexual inhibitor, is responsible for the detection of antiviral drugs, IL-3-dependent B-cell strain BaF3, IL-3-dependent cell lines, and Ras-dependent cell lines. Ras (S17N)-guided high-sensitivity (N6-cell) signaling, Ras-induced downflow, MAP-induced IL-3 stimulation, acidification (activation), and Ras (S17N) guidance. In the presence and absence of Ras (S17N), the cell number of N6 cells was calculated, and the results were compared by MTT method. The results showed that Ras (S17N) was detected, and N6 cells were completely affected. The results of the above results show that: 1) IL-3 stimulates MAP cells, activates Ras cells, and 2) IL-3-dependent cell colonies Ras cells need to be activated. At present, the same system is used in the system, active Ras (G12V) system is used to improve the performance of the system, and the IL-3 system is in the process of improving the performance of the Ras system.

项目成果

Akiko Ito et al.: "G protein βr snbunit activates Ras. Rat. and MAP kimare in HEK 293 cells" FEBS Letl.368. 183-187 (1995)

Akiko Ito 等人：“G 蛋白 βr snbunit 激活 HEK 293 细胞中的 Ras. Rat. 和 MAP kimare” FEBS Letl.368 (1995)。

Koji Terada et al.: "Ras in not reguired for the interleukin3-imolnced probteralri of a movre pro-B cell line, BaF3" J. Biol. Chem.270. 27880-27886 (1995)

Koji Terada 等人：“Movre pro-B 细胞系 BaF3 的白细胞介素 3 结合的 proteralri 不需要 Ras”，J. Biol。

Tomokazu Ohtsuka et al.: "Analysis of the T-cell activetrin signalirs pathnay mechiatel by tyrainihiniar protein kinpe C and Ras protein wlith is modrle-ted by introcellalin cyclic Amp." Biochem. Biophys: Acta. (印刷中). (1995)

Tomokazu Ohtsuka 等人：“通过 tyrainihiniar 蛋白 kinpe C 和 Ras 蛋白对 T 细胞活性蛋白信号通路进行的分析，由细胞内环 Amp 进行调制。”（出版中）。 1995)

Jimji Yamanchi et al: "Canboeye terminal of G protein β rnbunt in reguired for association with rsenlunit" Biochem, Bioghya. Res. Communs.214. 694-700 (1995)

Jimji Yamanchi 等人：“G 蛋白 β rnbunt 的 Canboeye 末端需要与 rsenlunit 结合”，Biochem，Bioghya.214。

Sadao Mari et al.: "Inhibition of Rae/Rat in teraction by anti-oncogenie mutants of neurobibromin, the nemafibuomatosis Tycel(NF1)gene podnit, in a All-free sep lene" J. Biol. Chem.270. 28834-28838 (1995)

Sadao Mari 等人：“在全游离分离中，神经二溴蛋白的抗癌基因突变体、线状纤维瘤病 Tycel(NF1) 基因 podnit 对 Rae/Rat 相互作用的抑制”J. Biol。