オンコジンによる細胞増殖因子の作用のmodulation

Oncodin 调节细胞生长因子的作用

• 批准号: 60015019
• 负责人: 上代 淑人
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60015019/
• 关键词: オンコジン; ras遺伝子; GTPase; Gプロテイン; 細胞増殖因子

我々は外来性シグナルによって活性化される細胞膜での応答がグアニンヌクレオチド結合タンパク質(Gs,Gi,Goおよびtransducin)によってmodulateされること、発癌型ras遺伝子産物のGTPase活性は正常型に比べ著しく低下していることなどに着目し、細胞増殖因子によるシグナル伝達過程におけるras遺伝子の機能を解析することを目的に研究をすすめてきた。このために細胞遺伝学的な手法によるras遺伝子の側からのアプローチと、生化学的手法によるrasタンパク質の側からのアプローチとを試みた。すなわち、(1)ラット胚由来の線繊芽細胞に、マウス乳ガンウイルスプロモーターを結合したras遺伝子を選択マーカーであるネオマイシン耐性遺伝子とともに、ポリブレン-DMSO法によって導入した。約70個のネオマイシン耐性の細胞株を得、これからさらにステロイドホルモンによって可逆的にトランスフォームする細胞株を単離した。この細胞株はステロイドホルモン存在下においてのみ軟寒天培地中でコロニーを形成する。単層培養ではステロイドホルモンにより増殖速度、飽和密度ともに増大した。増殖因子に対する要求性の変化を調べ、その因子からの細胞内へのシグナル伝達の変化を測定することは今後の課題である。(2)ヒトHa-ras遺伝子(発癌型および正常型)を大腸菌での発現ベクターを用いて発現誘導し、その産物を大量に調製した。ras遺伝子は入ファージ由来のC【II】遺伝子とのfused geneとして転写され、ras本来のN末端にさらに16アミノ酸残基が付加されている。大腸菌で発現された真核細胞遺伝子の産物は不溶性画分に分配されることがしばしばみうけられるが、我々のras遺伝子産物は可溶性画分から回収された。酵素化学的レベルでの正常型および発癌型rasタンパク質の諸性質の差異の検討、ras タンパク質と相互作用するmammalan細胞の形質膜タンパク質の検策などは今後の重要な課題である。

We aim to study the regulation of GTase activity of oncogenic ras gene products by regulating the activity of exogenous ras gene in cell membrane and analyzing the function of ras gene products compared with normal ras gene products. The method of cell genetics, the method of biochemistry, the method of cell genetics, the method of cell genetics (1) Embryo derived line bud cells, milk, protein, protein, About 70 cell lines resistant to the disease were isolated. This cell line is the first cell line to be cultured in the presence of a host cell. The growth rate and saturation density of monolayer culture increased. This is a future topic for the study of the regulation of the required changes in reproductive factors and the determination of the changes in the intracellular expression of these factors. (2)Ha-ras genes (cancer-developing and normal) are used to induce the development of E. coli, and their products are modulated in large quantities. The ras gene is composed of the C [II] gene of origin and the fused gene, and the original N-terminal of ras contains 16 amino acid residues. The products of eukaryotic genes developed by E. coli are distributed in insoluble fractions, and the products of ras are distributed in soluble fractions. A study of the differences in the properties of enzyme chemistries between normal and carcinogenic ras, and a study of the interaction between ras and proteins in mammalian cells is an important topic in the future.

项目成果

The EMBO Journal. 4-3. (1985)

EMBO 杂志。

医学のあゆみ. 133-13. (1985)

医学史。133-13。