Ras タンパク質を介するシグナル伝達系の解析

Ras蛋白介导的信号转导系统分析

• 批准号: 08265220
• 负责人: 上代 淑人
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265220/
• 关键词: Ras; 細胞内シグナル伝達系; GTP結合タンパク質

Ras蛋白質を介するシグナル伝達系は、繊維芽細胞では細胞増殖、褐色細胞腫PC12細胞では神経分化に関与している。血球細胞においても、RasはIL-2、IL-3などのサイトカインや、T細胞レセプターからのシグナル伝達系で分子スイッチとして機能している。血球系細胞のシグナル伝達に関しては、IL-3依存性BaF3細胞由来の細胞株を用いて、Rasを介する系の活性調節機構および生理機能の解析を行った。まず、IL-3刺激によってJNK1が活性化されることを見出した。さらにドミナント-ネガティブ変異型Ras(S17N)を誘導発現させるクローンを用いて、この系へのRasの関与を示した。しかし、ERK2の場合とは異なり、活性変異型Ras(G12V)のみではJNK1の活性化は認められず、第二のシグナルが必要である可能性が示唆された。次に、IL-3刺激によるRas活性化における、グアニンヌクレオチド交換反応促進因子mSos1の関与を検討した。mSos1の触媒領域を欠損したドミナント-ネガティブ変異体を誘導発現するクローンを樹立し、IL-3レセプター刺激によるRas活性化への影響を検討した。その結果、ドミナント-ネガティブmSos1変異体は、IL-3依存的なRasとその下流で機能しているRafやMAPキナーゼの活性化を抑制した。従って、IL-3レセプターからのシグナル伝達系においても、チロシンキナーゼレセプターの場合同様、mSos1が重要な機能を担っていることが示唆された。また、Swiss3T3細胞、HEK293細胞などを用いて、Rasを介するシグナル伝達系に対するRacやRalの各種変異体の効果を検討し、これらがRasの下流で機能していることを支持する結果を得た。さらに各種レセプターを介するJNK1の活性化を指標として、Rasと各種低分子量GTP結合タンパク質とのクロストークを検討した。これと関連して、Cdc42に結合するACKチロシンキナーゼの温度変化に伴うリン酸化や、アダプター分子Grb2との結合を明らかにした。

Ras protein mediates cell proliferation, cell proliferation, and differentiation in PC12 cells. The function of IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-5, IL-6, IL-6, IL-7, IL-7, IL-8, IL-8, IL-9, IL-9 The regulation mechanism of activity and physiological function of the system mediated by Ras and IL-3-dependent BaF3 cell lines IL-3 stimulated JNK1 activation, which was observed in the liver. The relationship between Ras(S17N) and the expression of Ras(S17N) is discussed. The possibility of activating JNK1 in the presence of ERK2, Ras(G12V), or ERK2 is also discussed. The relationship between IL-3 stimulation and Ras activation was discussed. To investigate the effects of IL-3 on the activation of Ras in the presence of mSOS1 in the catalytic domain As a result, Raf and MAP activation are inhibited by IL-3 dependent Ras and Ras downstream functions. In the same situation, mSos1 plays an important role in the development of IL-3 and IL-3. The results of the study of Rac and Ral heterogeneic effects in Swiss 3T3 cells and HEK293 cells were obtained. A variety of low molecular weight GTP binding agents are discussed. The combination of these two molecules is known as "Ack" and "Grb2."

项目成果

Tomokazu OhTsuka et al.: "Analysin of the T-cell activation signaling pathway mediated by Tyrosime kinase protein kinase C,and Risprotein,which is modulated by intracellnear cyclic AMP." Biochim.Biophys.Acta. 1310. 223-232 (1996)

Tomokazu OhTsuka 等人：“分析由酪氨酸激酶蛋白激酶 C 和 Ris 蛋白介导的 T 细胞激活信号通路，该通路由细胞内近环 AMP 调节。”

Koji Terada et al.: "Ras-dependent activation of c-Jun N-teminal kinase/strese-activated.protein kinase in response to interlenkin-3 stimulates in hemastopoietic BaF3 cells." J.Biol.chem.272. 4544-4548 (1997)

Koji Terada 等人：“造血 BaF3 细胞中，c-Jun N 末端激酶/应激激活蛋白激酶响应 Interlenkin-3 刺激而发生 Ras 依赖性激活。”

Takaya SaToh et al.: "Tyrosine phospharylation of ACK in reapome to Temperatme shift-down.kyperosmo Tic shock,and epidermal gnowth factar stimulation" FEBS Lett.386. 230-234 (1996)

Takaya SaToh 等人：“reapome 中 ACK 的酪氨酸磷酸化导致温度下调。kyperosmo 抽动休克和表皮生长因子刺激”FEBS Lett.386。

Yamauchi.J.et al.: "C-terminal mirtation of G.proteinβ Subunit affects differentially extra cellrlan signal-kinase and c-Jnn N-teminal kinase pathways in HEK 293 cells." J.Biol.Chem.272(印刷中). (1997)

Yamauchi.J.et al.：“G. Proteinβ 亚基的 C 末端镜像对 HEK 293 细胞中的细胞外信号激酶和 c-Jnn N 末端激酶通路产生不同影响。”（J.Biol.Chem.272） ）（1997）。

Mika Miyake et al.: "Unfanesylated tromsfarming Rar mntant inhibits the Ras-segnaling pathway by forming a stable Ras・Rat complex in the cytosal" FEBS Lett.378. 15-18 (1996)

Mika Miyake 等人：“Unfanesylated tromsfarming Rar mntant 通过在细胞质中形成稳定的 Ras·Rat 复合物来抑制 Ras 信号通路”FEBS Lett.378 (1996)。