骨肉腫細胞における導入p53遺伝子による放射線感受性支配の分子機構
骨肉瘤细胞导入p53基因调控放射敏感性的分子机制
基本信息
- 批准号:07274237
- 负责人:
- 金额:$ 1.47万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1995
- 资助国家:日本
- 起止时间:1995 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ヒト由来骨肉腫細胞(SAOS-2)p53cDNAを組み込んだ発現プラスミド(pMSVeneop53)をトランスフェクションし、G418にて選択し,比較的増殖の遅い60個のクローンを選んだ。これらのクローンからRANおよびタンパクを抽出し、p53遺伝子の発現について、ノーザンおよびウエスタンブロットを用いて検索し、さらにPT-PCRを行った結果、正常分子量のp53タンパクを発現しているクローン(SAOS-MC11)、C未満欠失と思うわれる分子量48kDaタンパクを発現しているクローン(SAOS-MC43)およびN末端欠失と思われるp53mRAMの発現はみられるがタンパク産生を行っていないクローン(SAOS-MC10)が得られた。p53遺伝子の導入により得られた3つのクローンと親株(SAOS-2)およびベクター導入株(SAOS-MSV)の放射線感受性を比較した場合、SAOS-MC11は親株やベクター導入株に比べて著しく放射線に感受性となり、SAOS-MC43は放射線抵抗性となった。また、SAOS-MC10については有意な放射線感受性の変化は認められなかった。フローサイトメトリーにより親株、ベクター導入株および3つのp53遺伝子導入クローンに関してフローサイトメトリーにより指数的増殖期における細胞周期分布を調べたところ、細胞株間における有意な差はみられなった。次に、放射線照射後の細胞周期分布について解析した。5Gy照射後20時間におけるDNAヒストグラムの結果、全てのクローンにおいてG2ブロックは共に見られたが、クローンSAOS-MC11も含めて放射線照射後の明確なGIブロックが欠けていた。しかし、SAOS-MC11細胞においては、放射線照射後に、DNAのマイクロフラクションが増大していた。このことは部分的なアポトーシスが起きていることを示唆している。
The p53cDNA of SAOS-2 cells was cloned into pMSVeneop53 and G418 respectively. 60 cDNA fragments were cloned into pMSVeneop53 and G418. The results of PT-PCR and the detection of p53 gene with normal molecular weight were analyzed.(SAOS-MC11), C terminal loss, C terminal loss, C terminal loss, When comparing the radiosensitivity of SAOS-MSV with that of SAOS-2, SAOS-MC11 and SAOS-MC43 showed radiosensitivity and radioresistance respectively. SAOS-MC10 is not intended to be radioactive. The cell cycle distribution of the parent strain, the introduced strain and the p53 gene introduced into the parent strain is regulated by the cell cycle distribution of the parent strain and the introduced strain. Next, the analysis of cell cycle distribution after radiation exposure. 20 hours after 5 Gy irradiation, DNA sequencing results, total DNA sequencing results, total DNA sequencing SAOS-MC11 cells were irradiated with radiation and DNA increased in size. This is the first time I've ever seen a woman.
项目成果
期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Junji Miyakoshi: "Changes in radiation sensitivity of human osteosarcoma cells after p53 introduction." Japanses Journal of Cancer Research. 86. 711-713 (1995)
Junji Miyakoshi:“引入 p53 后人类骨肉瘤细胞的辐射敏感性发生变化。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Junji Miyakoshi: "Exposure to 50 Hz magnetic field enhances β-galactosidase activity in rat PC12-VG cells." Journal of Japanses Society of Applied Electromagnetics and Mechanics. 3. 52-56 (1995)
Junji Miyakoshi:“暴露于 50 Hz 磁场可增强大鼠 PC12-VG 细胞中的 β-半乳糖苷酶活性。”日本应用电磁学和力学学会杂志 (Journal of Japanes Society of Applied Electromagnese and Mechanics) 3. 52-56 (1995)。
- DOI:
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- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Nobuyuki Yamagishi: "Modification of Radiosensitivity of human cells which have Simian virus 40 T-antigen introduced by transfection." Journal of Radiation Research. 36. 239-247 (1995)
Nobuyuki Yamagishi:“通过转染引入猿猴病毒 40 T 抗原,从而改变人类细胞的放射敏感性。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Junji Miyakoshi: "Increase in HPRT gene mutations by exposure to high-density 50 Hz magnetic fields." Mutation Research. 349. 109-114 (1996)
Junji Miyakoshi:“暴露于高密度 50 Hz 磁场会增加 HPRT 基因突变。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Junji Miyakoshi: "A newly designed experimental system for exposure of mammalian cells to extremely low frequency magnetic fields." Journal of Radiation Research.35. 26-34 (1994)
Junji Miyakoshi:“一种新设计的实验系统,用于将哺乳动物细胞暴露于极低频磁场中。”
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- 作者:
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