权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

発生工学を基礎とした骨格筋の形成機構とその異常の解析

基于发育工程的骨骼肌形成机制及其异常分析

基本信息

批准号：
08252214
负责人：
鍋島陽一
金额：
$ 2.56万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウス129遺伝子ライブラリーよりラミニンα2遺伝子をクローニングし、相同組み換えベクターを作成し、E14細胞に電気穿孔法により導入し、相同組み換え細胞を同定し、ついでノックアウトマウスを分離した。ラミニンα2mRNA,蛋白の発現解析によりホモマウスはnull変異であることを確認した。さらに電顕により筋、及び末梢神経を観察し、ホモマウスでは基底膜が観察されず、ラミニンα2が基底膜の形成に必須であることを確認した。野性型、ヘテロ、ホモはメンデルの法則に従って生まれるが、生後14日ころよりホモマウスの成長が遅れるようになり、21日頃になるとよろめきやけいれん症状を伴う筋ジストロフィーを発症する。なお、ヘテロマウスは野性型と区別がつかない。そこでホモマウスの組織学的解析を筋肉、神経系を中心に行い、次の結果を得た。生後9日までの筋組織は野性型と変わらないようにみえるが、生後11日には変性筋細胞が認められ、ついで生後13日には中心核をもつ再生筋線維が観察されるようになる。マウスでは、ちょうど、この時期に最終的な成熟がおこり、速筋では親型のミオシン重鎖(MHC)アイソフォームであるMHCIIBへと変換が起こるが、ホモ変異個体ではIIBの発現が観察されず、基底膜の形成が速筋の成熟に重要であることが示された。一方、遅筋線維で発現するβ/slow MHCの発現が認められ、若いマウスの遅筋の成熟は基底膜の形成に影響されないようである。ホモマウスの中枢神経系がやや小さく、組織学的には小脳の顆粒細胞、プルキニエ細胞の移動に異常があり、野性型では存在しない位置(白質やpia materの外側など)に一部の顆粒細胞、プルキニエ細胞が観察された。また、ホモマウスでは隣り合う小葉間の癒着が認められ、さらに抗ミエリン塩基性蛋白抗体で染まる白質が細いことが確認された。

E14 cells were introduced by electroporation, and the cells of the same group were isolated. The expression of α2mRNA and protein was analyzed and confirmed. The basement membrane is observed and identified. Wild type,なお、ヘテロマウスは野性型と区别がつかない。The histological analysis of the muscle and nervous system was carried out in the middle and the lower part of the body. On the 9th day after birth, the tendon tissue is wild type, and on the 11th day after birth, the tendon cells are recognized, and on the 13th day after birth, the central nucleus is reverse to regenerate the tendon line. The development of IIB and the formation of basement membrane are important for the maturation of fast tendon. The development of β/slow MHC in the development of a square, smooth muscle line is recognized, and if so, the maturation of the smooth muscle affects the formation of basement membrane. The central nervous system is composed of small cells, histologically small granular cells, abnormal movement of granular cells, and wild cells. Some granular cells and granular cells are observed. A line of anti-inflammatory antibodies was identified.