LIMモチーフをもつプロテインキナーゼLIMKによる細胞増殖制御機構の解析

带有LIM基序的蛋白激酶LIMK的细胞增殖调控机制分析

• 批准号: 08264226
• 负责人: 水野 健作
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08264226/
• 关键词: LIMK; プロテインキナーゼ; LIMモチーフ; 細胞増殖; プロテインキナーゼC; 神経

私達は、1994年、LIMモチーフとよばれる特徴的なジンクフィンガー構造を分子内にもち、既知のプロテインキナーゼとは構造的にも大きく異なった新しいクラスのプロテインキナーゼ、LIM-kinase(LIMK1)のクローニングに世界ではじめて成功し、その全構造を明らかにした。さらに、LIMK1と構造類似したプロテインキナーゼLIMK2,TESK1のクローニングにも成功した。LIMモチーフとは2個のジンクフィンガー構造からなる構造モチーフで、蛋白質間の相互作用に関与することが示唆されている。LIMK1はLIMモチーフとプロテインキナーゼを合わせもつ最初のプロテインキナーゼであり、その細胞機能の解明は未知の細胞内情報伝達経路の解明につながる重要な課題であると考えられる。本研究では、これらのキナーゼの細胞機能、発現分布を解析し、以下の点を明らかにした。1、Rat-1A線維芽細胞において、LIMK1蛋白質の発現は、増殖相で高く、増殖停止期では検出できない。2、NIH3T3細胞および活性型RasでトランスフォームしたFYJ10線維芽細胞にLIMK1を過剰発現すると、増殖が著しく抑制された。一方、アンチセンスLIMK1 cDNAを導入すると、NIH3T3細胞の増殖が促進された。3、LIMK1は、N末端LIM領域とC末端キナーゼ領域間の相互作用により、少なくとも一部は二量体を形成することを明らかにした。4、LIMK1はLIMドメインを介して、種々のプロテインキナーゼCサブタイプと結合することを明らかにした。5、ラット発生過程におけるLIMK1およびLIMK2の発現分布を調べ、いずれも胎生期の脳神経系に高発現しているが、生後は異なる分布を示すことを明らかにした。

Private は, 1994, LIM モ チ ー フ と よ ば れ る of 徴 な ジ ン ク フ ィ ン ガ ー tectonic を intramolecular に も ち, both known の プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ と は constructed に も big き く different な っ た new し い ク ラ ス の プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ, LIM kinase (LIMK1) の ク ロ ー ニ ン グ に world で は じ め て into The entire structure of the work is を, ら, に and た. さ ら に, LIMK1 と structure similar し た プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ LIMK2, TESK1 の ク ロ ー ニ ン グ に も successful し た. LIM モ チ ー フ と は 2 の ジ ン ク フ ィ ン ガ ー tectonic か ら な る tectonic モ チ ー フ で の interaction between, protein に masato and す る こ と が in stopping さ れ て い る. LIMK1 は LIM モ チ ー フ と プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ を close わ せ も つ initially の プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ で あ り, そ の cell function の interpret は intelligence 伝 の cell of unknown 経 road の interpret に つ な が る important topic な で あ る と exam え ら れ る. This study で は, こ れ ら の キ ナ ー ゼ の cell function, analytical し 発 distribution を now, the following point の を Ming ら か に し た. The Rat-1A line germ cells にお にお て て, LIMK1 protein <s:1>, the proliferative phase で is high く, and the proliferative arrest phase で 検 検 is で な な な て. Type 2, NIH3T3 cells お よ び active Ras で ト ラ ン ス フ ォ ー ム し た FYJ10 line d bud cells に LIMK1 を before turning 発 now す る と, raised colonization が し く inhibit さ れ た. One side, ア チセ チセ ス スLIMK1 cDNAを introduction すると, <s:1> proliferation が of NIH3T3 cells promotes された. 3, LIMK1 は と C, N terminal LIM field terminal キ ナ ー ゼ の interaction between field に よ り, less な く と も a を は 2 quantity body formation す る こ と を Ming ら か に し た. 4, LIMK1 は LIM ド メ イ ン を interface し て, kind of 々 の プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ C サ ブ タ イ プ と combining す る こ と を Ming ら か に し た. 5, ラ ッ ト 発 birth process に お け る LIMK1 お よ び LIMK2 の 発 distribution を べ, now い ず れ も TaiShengQi の 脳 経 god is high に 発 now し て い る が, postnatal は different な を る distribution in す こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

J.Hiraoka et al.: "Self-association of LIM-kinase 1 mediated by the interaction between an N-terminal LIM domain and a C-terminal kinase domain" FEBS Lett.399. 117-121 (1996)

J.Hiraoka 等人：“LIM 激酶 1 的自关联由 N 端 LIM 结构域和 C 端激酶结构域之间的相互作用介导”FEBS Lett.399。

T.Mori et al.: "Comparison of tissue distribution of two novel serine/threonine kinase genes containing the LIM motif(LIMK-1 and LIMK-2)in the developing rat" Molec.Brain Res.(in press). (1997)

T.Mori 等人：“发育中大鼠中含有 LIM 基序（LIMK-1 和 LIMK-2）的两种新型丝氨酸/苏氨酸激酶基因的组织分布比较”Molec.Brain Res.（出版中）。

永田恭子(共著): "細胞増殖因子療法" メディカルレビュー社, 333 (1996)

Kyoko Nagata（合著者）：《细胞生长因子疗法》医学评论出版，333（1996）

K.Nagata et al.: "Suppression of fibroblast cell growth by overexpression of LIM-kinase 1." J.Biol.Chem.271. 30022-30027 (1996)

K.Nagata 等人：“通过 LIM 激酶 1 的过度表达抑制成纤维细胞生长。”

S.Kuroda et al.: "Protein-protein interaction of zinc finger LIM domains with protein kinase C" J.Biol.Chem.271. 31029-31032 (1996)

S.Kuroda 等人：“锌指 LIM 结构域与蛋白激酶 C 的蛋白质-蛋白质相互作用”J.Biol.Chem.271。