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神経線維腫症1型遺伝子異常の蛋白発現ベクターを応用した診断法の確立

神经纤维瘤病1型基因异常蛋白表达载体诊断方法的建立

基本信息

批准号：
08266237
负责人：
松尾雅文
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266237/
关键词：
In vitro翻訳転写点突然変異マイクロサテライトがん遺伝子

项目摘要

巨大な遺伝子あるいは多くのエクソンを有する遺伝子で、遺伝子の中に存在する点突然変異を明らかにすることは極めて困難なことである。そのため、遺伝子異常解析上の難点を克服するため様々な方法が考えられてきている。研究者は遺伝子の異常をDNAを直接解析することにより明らかにするのではなく、遺伝情報の産物である蛋白を解析することにより効率的な遺伝子異常解析システムが確立されると着想した。そして、リンパ球中のmRNAを解析材料として、これを逆転写酵素によりcDNAにかえ、このcDNAをテンプレートしてIn vitroでの転写・翻訳系を用いて蛋白を産生させ、産生された蛋白のサイズの異常を明らかにする解析系を構築してきた。現在、本システムの有用性を検討するため、がんの発生と大きく関与しているDNA修復遺伝子で、その異常検出能について解析している。そして、遺伝子異常検出能を検討する準備段階としてDNA修復遺伝子異常の存在を発見する方法の確立につとめた。そのため、DNA修復遺伝子異常の存在を示唆するマイクロサテライトの不安定性の容易な検出法の確立をはかった。ここでは、自動DNA塩基配列解析方法を応用した簡易なマイクロサテライト不安定性の検出法を確立した。これにはマイクロサテライトを蛍光ラベルしたプライマーを用いてPCR増幅し、これを自動DNA塩基配列解析装置により分離同定した。この方法では2塩基の差も明らかに分離でき、高性能でしかも容易な方法が確立できた。そして、この方法を用いて日本人のがん家系でマイクロサテライト不安定性を示す例を発見することが出来た。この症例では、DNA修復遺伝子の異常が強く疑われ、DNA修復遺伝子の異常を今回確立したIn vitro翻訳系で解析している。

There is a sudden change in the number of points that exist in the child, and there is a point in the child. The method of overcoming the problem is often analyzed in terms of the number of points in the analysis. The researchers said that the rate of DNA was higher than that of the control, and that the rate of the analysis of the protein was not. The mRNA in the ball is used to analyze the material, the enzyme, the enzyme, the cDNA, the cDNA, the In vitro, the protein, the protein. At present, the usefulness of this system is to improve the quality of the system, to improve the quality of the system, and to improve the performance of the DNA. It is often possible to make sure that there is a problem in the preparation of the DNA repair system. There is often a sign of instigation and instigation in the diagnosis of uneasiness and uneasiness in the diagnosis of uneasiness, and there is often an indication that it is easy to make sure that the law is established. The analytical method of automatic and automatic DNA base configuration is based on the use of the method of determining the nature of the problem. Do you want to use the PCR frame or the automatic DNA based column analysis device to separate and determine the same level of equipment? The basic differences of the two methods are clear, and the high-performance methods are easy to confirm. The qualitative analysis of "Japanese", "pedigree", "pedigree", "family", "Japanese", "family", "family", "restlessness", "come out". Make sure that you have a problem with your symptoms, that you often have a problem with DNA repair, that you often have a problem with DNA repair, and that you have to make sure that this time you make sure that In vitro is an analytical tool.